[发明专利]一种筛选活性成分和活性组合物的方法

摘要

本发明涉及高通量筛选领域，具体涉及一种基于生物化学反应发现活性成分以及活性组合物的方法。本发明首先通过对洗脱条件和酶促反应条件进行考察及优化，完成在线装置的搭建；其次将准备好的样品进样，完成化合物的分离以及活性成分的筛选；然后利用高分辨质谱技术对活性成分进行结构鉴定；最后围绕发现的活性成分自由组合，利用在线装置探究其相互作用关系。本发明集生物活性成分的发现、分离及鉴定于一体，尤其适用于化合物种类复杂的体系。与此同时，本发明在提高筛选的准确率、降低假阳性结果上表现出明显的优势，是一种有效、可靠的高通量筛选方法。

主权项

1.一种筛选活性成分的方法，其特征是，步骤如下：（1）将准备好的样品自动进样，在一定的洗脱条件下分离待测物，同时补偿泵调节洗脱液中的有机相，使之维持在一个恒定的范围内；调节后的洗脱液流经酶泵，在第一个反应线圈中与酶溶液相互作用；然后混合液经过底物泵，在第二个反应线圈中酶催化底物，于470nm吸收波长下观察产物是否有倒峰生成，实现活性成分的分离及筛选；待测物的分离以及洗脱液补偿的有机溶剂是甲醇或乙腈；待测物是表没食子儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、杨梅素、丹参素、紫草酸、原儿茶醛、丹酚酸B、丹酚酸D、迷迭香酸中的一种或几种，或是含有这些成分的中药提取物或中药复方提取物；参与反应的酶是以过氧化氢为底物，以愈创木酚为显色剂，含有血红素的过氧化物酶家族中的一员，来源是动物、植物或微生物；（2）利用质谱技术对活性成分进行结构鉴定；（3）围绕活性成分自由组合，利用在线装置探究其作用关系。