[发明专利]一种改善土壤重金属污染的真菌菌剂的制备方法

摘要

本发明属于微生物菌剂技术领域，特别涉及一种改善土壤重金属污染的真菌菌剂的制备方法。该改善土壤重金属污染的真菌菌剂的制备包括：(1)菌种活化；(2)切菌丝体小块；(3)将各菌菌丝体小块转接到相应液体培养基中，摇床振荡暗培养得各菌种子液；(4)按一定重量比，将菌剂承载物混匀并粉碎过筛得粉末，再高温灭菌得混合菌剂承载物；(5)将混合菌剂承载物和无菌水加到发酵罐中得混合培养基；(6)将各菌种子液接种到混合培养基中暗培养得发酵菌液；(7)将发酵菌液过滤、干燥、粉碎，分装即得。该改善土壤重金属污染的真菌菌剂的制备方法科学、成本低廉，制得的菌剂肥效显著，能有效避免土壤中植物根系的重金属侵染，提高土壤品质。

主权项

1.一种改善土壤重金属污染的真菌菌剂的制备方法，其特征是：包括如下操作步骤：/n(1)分别挑取褐环乳牛肝菌、美味牛肝菌及红绒盖牛肝菌的斜面菌种的边缘菌丝接种于PDA固体培养基中，28℃条件下暗培养48h，得活化菌种；/n(2)取步骤(1)经活化培养的各菌种的菌丝体培养基，分别切成菌丝体小块，备用；/n(3)在无菌条件下，将步骤(2)得到的褐环乳牛肝菌菌丝体小块转接到褐环乳牛肝菌液体培养基中，26-30℃条件下摇床振荡暗培养5-6d，得褐环乳牛肝菌种子液；/n在无菌条件下，将步骤(2)得到的红绒盖牛肝菌菌丝体小块转接到红绒盖牛肝菌液体培养基中，28-32℃条件下摇床振荡暗培养5-6d，得红绒盖牛肝菌种子液；/n在无菌条件下，将步骤(2)得到的美味牛肝菌菌丝体小块转接到美味牛肝菌液体培养基中，24-28℃条件下摇床振荡暗培养5-6d，得美味牛肝菌种子液；/n(4)按(4-6)：(1-3)：(2-4)：(0.5-1)：(1-3)的重量比，将菌剂承载物：玉米芯、麸皮、棉籽壳、壳聚糖、木屑依次投入到混合搅拌机中，充分混合，混匀后经粉碎机粉碎过筛，得0.5-1mm粉末，再经120℃高温灭菌30min，得混合菌剂承载物，备用；/n(5)按与无菌水重量比为(10-12):25的比例，将步骤(4)灭菌的混合菌剂承载物和无菌水加入到发酵罐中，得混合培养基；/n(6)按照占发酵培养基重量5％的接种量，分别将三种菌的种子液接种到步骤(5)的混合培养基中，在26-30℃条件下搅拌暗培养6-8天，得发酵菌液；/n(7)将步骤(6)的发酵菌液过滤，得含有菌丝体的滤饼，经干燥降低水分至不高于15％，粉碎滤饼至60目-100目，分装即得；/n步骤(3)的褐环乳牛肝菌液体培养基为：葡萄糖20g/L、麦芽汁10mL/L、酵母膏6g/L、磷酸二氢钾0.25g/L、硫酸镁0.3g/L、氯化钙0.19g/L、柠檬酸0.1g/L、氯化铁0.15g/L、VB