[发明专利]一种基于冠心病心阳虚证的代谢标记物的鉴定方法

摘要

一种基于冠心病心阳虚证的代谢标记物的鉴定方法，本发明涉及代谢标记物的鉴定方法。本发明是要解决临床冠心病心阳虚证的诊断仍不具备足够敏感性造成方剂体内成分与疗效关系难以有效揭示的问题，而提出的一种基于冠心病心阳虚证的代谢标记物的鉴定方法。该方法是通过步骤一、利用UPLC‑G2‑Si‑HDMS方法对n组健康受试者和n组冠心病心阳虚证受试者的血清样品进行UPLC分析确定血清样品中内源性代谢物；步骤二、利用G2‑Si‑HDMS方法在正、负离子模式下对内源性代谢物进行全扫描确定内源性代谢物结构；步骤三、鉴定冠心病心阳虚证受试者血液代谢生物标记物等步骤实现的。本发明应用于代谢标记物的鉴定领域。

主权项

一种基于冠心病心阳虚证的代谢标记物的鉴定方法，其特征在于，该方法具体是按照以下步骤进行的：步骤一、利用UPLC‑G2‑Si‑HDMS方法对n组健康受试者和n组冠心病心阳虚证受试者的血清样品进行UPLC分析确定血清样品中内源性代谢物；步骤二、利用G2‑Si‑HDMS方法在正、负离子模式下对内源性代谢物进行全扫描得到质谱代谢轮廓图；根据质谱代谢轮廓图进行模式识别及统计分析，选取保留时间和质核比一致的数据进行鉴定确定内源性代谢物结构；步骤三、鉴定冠心病心阳虚证受试者血液代谢生物标记物；步骤三一、将内源性代谢物进行监督型OPLS‑DA分析，分析得到正、负离子模式下的血液样本OPLS‑DA模型二维得分Scores plot；根据得分Scores plot分析血液样本数据；步骤三二、使用PCA，OPLS‑DA获得潜在的生物标记物，根据分析的血液样本数据从OPLS‑DA模型的S‑plot列表中获得潜在生物标记物的各离子质量数；步骤三三、根据内源性代谢物结构获得的内源性代谢物结构分子式以及潜在的生物标记物离子获得的二级质谱信息进行独立样本t检验鉴别了38个生物标记物；其中，所述38个生物标记物具体为尼古丁亚胺、25‑羟基维生素D2‑25‑葡糖苷酸、全‑反‑七异戊烯‑二磷酸、D‑半乳糖、17a,21‑二羟娠烯醇酮、溶血卵磷脂、油酸酰胺、乳糖神经酰胺、鞘磷脂、卵磷脂、亚油酸、尿酸、D‑乳酸、胞嘧啶核苷、D‑色氨酸、左旋谷酰胺、壬二酸、血管紧张素III、4‑对羟基苯甲醛、4‑对羟基苯甲酸、癸二酸、硫酸雄甾酮、脱氢异雄酮、N‑[(3a,5b,7a)‑3‑羟基‑24‑氧化‑7‑(磺酰)cholan‑24‑yl]‑甘氨酸、甘油鹅脱氧胆酸3‑葡萄糖醛酸苷、孕二醇‑3‑葡萄糖醛酸苷、鹅去氧胆酸、3β,7α‑二羟基‑5‑胆固酸酯、神经酰胺、11,12‑环氧二十碳三烯酸、溶血卵磷脂、花生四烯酸、泛醌、非对称性二甲基精氨酸、尿苷/尿嘧啶核苷、吡咯烷酮羧酸、苯乙酰胺、a‑N‑苯乙酰基‑L‑谷氨酰胺。