[发明专利]一种基于双共反应剂放大信号的电致发光免疫传感器的制备方法及应用

摘要

本发明涉及电致化学发光免疫传感器技术领域，特别是涉及一种以硫化镉和二硫化钼纳米复合物（CdS/MoS₂）为发光材料和基底材料，以过硫酸钾和过氧化氢为双共反应剂增强发光强度的免疫传感器的制备方法及应用。将CdS和MoS₂两种带隙相近的半导体纳米材料复合，可以提高导电效率和电子‑空穴分离效率；K₂S₂O₈和H₂O₂作为双共反应剂可以发挥协同效应，提高传感器的发光强度、增强稳定性。基于抗原抗体之间的特异性结合，该传感器用于检测原降钙素（PCT），根据不同浓度的PCT对电子传递阻碍程度不同，从而使得传感器电致化学发光强度不同，实现PCT的检测。

主权项

1.一种基于双共反应剂放大信号的电致化学发光免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)用1.0μm、0.3μm、0.05μm的Al2O3抛光粉依次打磨直径为4mm的玻碳电极GCE，分别在乙醇和超纯水中超声清洗5min，氮气吹干，取6～10μL CdS/MoS2纳米复合材料分散液滴涂到电极表面，室温下晾干成膜，用PBS pH 7.4缓冲溶液冲洗以除去未键合的CdS/MoS2得到CdS/MoS2/GCE；(2)取10μL 8～10μg/mL的原降钙素抗体anti‑PCT标准溶液滴涂到电极表面，4℃下孵化过夜，用PBS pH 7.4缓冲溶液冲洗得anti‑PCT/CdS/MoS2/GCE；(3)取10μL质量分数为1～3％的牛血清白蛋白BSA溶液滴涂到电极表面，在37℃下孵化1h，封闭非特异性结合的位点，用PBS pH 7.4缓冲溶液冲洗电极表面得到BSA/anti‑PCT/CdS/MoS2/GCE；(4)滴加10μL浓度为0.0001～10ng/mL的一系列不同浓度的原降钙素标准溶液用于与抗体特异性识别，在37℃下孵育60min，用PBS pH 7.4缓冲溶液冲洗电极表面，制得一种基于CdS/MoS2的电致化学发光免疫传感器PCT/BSA/anti‑PCT/CdS/MoS2/GCE；所述的CdS/MoS2纳米复合材料分散液，其特征在于，制作步骤如下：称取一定量摩尔比例为1:1的CdCl2和NaMoO4加入到100mL水中，超声至完全溶解，加入2.66g硫脲和1.0g PVP，搅拌得乳白色分散液，将分散液转移到100mL高压釜中，180℃反应48h，自然冷却，用1:1的水和乙醇洗涤三次，干燥过夜，得CdS/MoS2粉末；称取10mg CdS/MoS2粉末超声分散到10mL超纯水中，即得CdS/MoS2纳米复合材料分散液。