[发明专利]一种新型固定化酶制剂及其制备方法与应用

摘要

本发明属于生物催化领域，具体涉及一种新型固定化酶制剂及其制备方法与应用。所述的新型固定化酶制剂的制备方法，包含如下步骤将具有磁性的纳米磁性壳聚糖微球和具有多孔、大比表面积和多金属位点等诸多性能的金属‑有机骨架材料通过接枝共聚的方式结合，得到具有多孔网络结构的核壳结构的纳米磁性壳聚糖‑金属有机骨架材料；然后将纳米磁性壳聚糖‑金属有机骨架材料作为载体与酶液混合，在0～25℃的温度下固定化1～12h，得到新型固定化酶制剂；该方法能够固定化脂肪酶、蛋白酶、过氧化物酶等酶，成本较低、固定化效率高、酶的稳定性好、载酶量高，酶活回收率高；固定化过程中不使用双功能试剂，操作简单，成本低，反应温和。

主权项

一种新型固定化酶制剂的制备方法，其特征在于包含如下步骤：(1)将壳聚糖溶解至醋酸溶液中，得到壳聚糖乙酸溶液；然后在壳聚糖乙酸溶液加入四氧化三铁磁流体，40～50℃超声反应40～60min，得到产物1；将产物1加入液体石蜡/Span‑80混合液中混合均匀，然后在60～70℃恒温水浴、快速搅拌的条件下加入交联剂戊二醛，并调节反应体系pH为9～11，恒温水浴继续反应1～2h，除杂，干燥，得到纳米磁性壳聚糖；(2)将γ‑环糊精和苯甲酸钾溶于水中，然后加入甲醇混匀，60～80℃反应12～24h后通氮气鼓泡使甲醇和水自然挥发，析出结晶，过滤，洗涤，干燥，得到金属有机骨架材料；(3)将步骤(1)制得的纳米磁性壳聚糖加入NaOH溶液中碱化处理1～2h，然后加入步骤(2)制得的金属有机骨架材料40～60℃反应8～10h，得到纳米磁性壳聚糖‑金属有机骨架材料；(4)将上述纳米磁性壳聚糖‑金属有机骨架材料作为载体与酶液混合，在0～25℃的温度下固定化1～24h，得到新型固定化酶制剂。