[发明专利]一种混入反刍动物来源的猪肝素钠粗品的检测方法

摘要

本发明公开了一种混入反刍动物来源的猪肝素钠粗品的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤（一）：以猪肝，牛肝和羊肝为样品提取肝素钠DNA；步骤（二）：将猪肝，牛肝和羊肝提取的肝素钠DNA经测定 265 nm 处吸光度以及 265 nm 与 285nm 处吸光度的比值从而判断所提取的DNA 的纯度，纯度在 1.8~1.9 之间即符合要求，以此作为DNA模板；步骤（三）：通过PCR 模板的制备、引物设计和PCR扩增反应体系；步骤（四）：采用荧光探针得到qPCR结果，扩增曲线平均Ct 值为 14.566±0.624，猪源肝素钠DNA中掺杂有牛源肝素钠DNA；扩增曲线平均Ct 值为15.271±0.256，猪源肝素钠DNA中掺杂有羊源肝素钠DNA，本发明特异性好，灵敏度高、准确性高，用于不同种属来源的粗品肝素钠的定性检测，保证用药安全提供了技术支持。

主权项

一种混入反刍动物来源的猪肝素钠粗品的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一：以猪肝，牛肝和羊肝为样品提取肝素钠DNA；步骤二：将猪肝，牛肝和羊肝提取的肝素钠DNA经测定 265 nm 处吸光度以及 265 nm 与 285nm 处吸光度的比值从而判断所提取的DNA 的纯度，纯度在 1.8~1.9 之间即符合要求，以此作为DNA模板；步骤三：通过PCR 模板的制备、引物设计、PCR扩增反应体系和PCR反应程序, 得到扩增产物； 步骤四： 采用荧光探针得到qPCR结果，扩增曲线平均Ct 值为 14.566±0.624，猪源肝素钠DNA中掺杂有牛源肝素钠DNA；扩增曲线平均Ct 值为15.271±0.256，猪源肝素钠DNA中掺杂有羊源肝素钠DNA。