[发明专利]荧光生物传感器，其制备方法及其用途

摘要

本发明涉及一种荧光生物传感器的制备方法及其应用，基于聚胸腺嘧啶单链(poly T)的DNA可以成为制备发荧光的铜纳米粒子(Cu NPs)的模板的事实，发现一种新型的“糖果”(CS)构型的DNA结构，相较于传统的poly T为模板的制备Cu NPs，增强了Cu NPs的荧光信号，提高的发光效率。基于此现象，设计了一种新型的无标记的荧光恢复的生物传感器，该传感器利用了外切酶(exo III)和金属离子切割的双循环自动放大手段，特异性的检测特殊序列的DNA。该传感器具有很好的灵敏度，而且具有高的选择性，价格低廉和操作简单的特点。

主权项

1.荧光生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）DNA用缓冲溶液稀释并储存；（2）发夹 DNA包括 HP1，HP2，HP3和HP4使用前加热，冷却到室温，使之形成发夹结构；（3）发夹HP1和DNA在缓冲溶液中混合，然后在反应的溶液中加入exoIII，溶液中的 DNA位点被exoIII切割完成后，使exoIII失活；（4）释放出DNAzyme，释放的DNAzyme与HP3和HP2杂交，加入Zn²⁺溶液，Zn²⁺切割DNA上的rA位点;（5）S1和S2 被释放与HP4杂交；（6）点亮Cu NPs；步骤（ 5）中，S1和S2 将被释放与HP4杂交，形成双通“糖果”结构；步骤（6）中，加入16μL，100mM的抗坏血酸钠和8μL，10mΜ的硫酸铜，点亮 Cu NPs，终体积是 260μL。