[发明专利]一种动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法

摘要

本发明提供了一种动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法，包括，对动植物油中甘三酯进行层析分离并收集甘油三酯，将其用脂肪酶水解后，对水解产物经薄层层析分离，确定α游离脂肪酸并收集进行衍生化处理，进气相色谱检测，测定甘油三酯中α位脂肪酸的组成及含量。该方法具有操作简便、试剂安全、需要溶剂消耗量少、分析结果准确、检测限低、分析时间快的优点、样品需求量低。

主权项

一种动植物油脂甘三酯α位脂肪酸的测定方法，其特征在于：包括，对动植物油中甘三酯进行层析分离并收集甘油三酯；将其用脂肪酶水解后，对水解产物经薄层层析分离，确定α游离脂肪酸并收集进行衍生化处理；进气相色谱检测，测定甘油三酯中α位脂肪酸的组成及含量；其中，所述脂肪酶为米根霉发酵生产的α特异性脂肪酶，其添加量为甘油三酯质量的5~15%；所述脂肪酶水解，还加入MgCl2，且满足添加后Mg2+在混合液中的浓度为3~4mmol/L；所述薄层层析分离，其是将硅胶G板置于105℃烘箱中活化1h，然后用0.4mol/L 硼酸溶液饱和处理，自然通风晾干后进行展开，在薄板上均匀喷洒0.2 wt%的2，7‑二氯荧光素的甲醇溶液并在紫外灯下显色处理，油酸作为参照标样，确定α‑游离脂肪酸在高效薄层色谱上的位置，将α‑游离脂肪酸条带刮下，用乙醚提取；所述进行展开，其中，使用的扩展液为己烷、乙醚、乙酸按体积比为70~80：20~30：0.5~1的混合液，处理时间为40~50min；所述衍生化处理，其是使用氮吹仪将溶剂挥发掉，并向离心管中加入1~2mL 正己烷和 0.5~1mL 1~1.5mol/L的氢氧化钠‑甲醇溶液，将混合液涡旋混匀 1min，4000~5000r/min 离心3~5min，收集上清液。