[发明专利]癌细胞内过氧化氢检测比色/荧光纸芯片的制备有效
申请号: | 201610721320.5 | 申请日: | 2016-08-25 |
公开(公告)号: | CN106353287B | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 梁琳琳;葛慎光;于京华;兰飞飞;李丽 | 申请(专利权)人: | 济南大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/25;G01N21/78 |
代理公司: | 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 | 代理人: | 李茜 |
地址: | 250022 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种比色/荧光纸芯片的制备方法及测定细胞内的过氧化氢的方法。利用蜡打印技术在纸芯片上制备疏水区域、亲水区域以及中空通道,通过激光切割机切割中空通道。在工作区域2上生长二氧化铈,利用二氧化铈的类酶性质,与过氧化氢变成橘黄色,实现了可视化的比色检测。又因过氧化氢可以替代吸附在二氧化铈上的DNA,通过荧光信号“关‑开”,从而实现高灵敏的荧光测定。 | ||
搜索关键词: | 癌细胞 过氧化氢 检测 比色 荧光 芯片 制备 | ||
【主权项】:
1.比色/荧光纸芯片检测癌细胞内过氧化氢的方法,其特征是包括以下步骤:1.1 在计算机上设计比色/荧光纸芯片的疏水蜡打印区域和亲水工作区域;1.2通过蜡打印机将步骤1.1中设计的纸芯片打印上疏水图案,随后将得到的纸芯片于120‑150 ºC下加热1‑2 min,使蜡融化,形成疏水层;1.3利用激光切割机,对步骤1.2中得到的纸芯片进行切割,最终得到纸芯片由左侧纸芯片从左到右的加样区、亲水区域2和亲水区域1以及右侧纸芯片的五个圆形孔洞区组成;1.4在步骤1.3中所得纸芯片的亲水区域1上生长二氧化铈;1.5将生物相容性好的荧光物质修饰的DNA、适配体链及癌细胞固定到步骤1.4所得的纸芯片上,随后用牛血清白蛋白封锁活性位点;1.6在步骤1.5所得的纸芯片亲水区域2上埋伏储备液;1.7将步骤1.6所得的纸芯片从右向左折叠,进行可视化比色检测;随后放入荧光设备中,在一定的激发波长和发射波长下进行精确荧光测定。
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