[发明专利]一种零背景的平末端克隆载体pUB857及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 201610709625.4 | 申请日： | 2016-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN107760703A | 公开（公告）日： | 2018-03-06 |
| 发明（设计）人： | 汪洋;张开;易军;苏会娟 | 申请（专利权）人： | 南京理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/66 |
| 代理公司： | 南京理工大学专利中心32203 | 代理人： | 刘海霞,朱显国 |
| 地址： | 210094 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种零背景的平末端克隆载体pUB857构建及其在基因克隆和基因文库构建中的应用。本发明通过采用Gibson Assembly技术，将分别PCR扩增获得的cI857‑PR启动子以及ccdB基因片段与经PvuII酶切处理的pUC19质粒连接，获得平末端克隆载体pUB857。平末端克隆载体pUB857可克隆任意PCR产物，并且以ccdB作为反筛选标记时克隆阳性率可以达到100％。此外，该克隆载体也可用于基因组文库的高效构建，同时能有效避免空载体干扰，是后基因组时代高通量基因筛选与功能验证的一种有效工具。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 背景 末端 克隆 载体 pub857 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种零背景的平末端克隆载体pUB857，其特征在于，为利用PvuII酶切pUC19质粒形成线性DNA链，同时在酶切位点连接ccdB和cI857‑PR形成的全长序列为SEQ IDNO.9的克隆载体，所述的ccdB开放阅读框上设计有SmaI酶切位点。
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