[发明专利]用于鉴别大西洋鲑和虹鳟的生物传感检测方法有效
申请号: | 201610605038.0 | 申请日: | 2016-07-27 |
公开(公告)号: | CN106018523B | 公开(公告)日: | 2018-08-31 |
发明(设计)人: | 赵紫霞;张瀚元;徐桂彩 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院 |
主分类号: | G01N27/327 | 分类号: | G01N27/327;G01N27/48;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 史霞 |
地址: | 100039 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了用于鉴别大西洋鲑和虹鳟的生物传感检测方法,包括如下步骤:步骤一、提取待检测样品的基因组DNA,利用大西洋鲑特异性引物对,以待检测样品的基因组DNA为模板进行PCR反应,得到待检测样品的PCR扩增产物Ⅰ,且大西洋鲑特异性引物对各自分别于碱基序列的上游带有电化学活性标记分子和锚定标记分子;步骤二、将步骤一中得到的PCR扩增产物加于修饰有锚定受体的电极表面进行反应,锚定标记分子可被锚定受体捕获,以使带有锚定标记分子的PCR扩增产物被电极表面捕获;和步骤三、检测电化学活性标记分子的电化学信号,若存在电化学标记分子的电化学信号,则待检测样品来自于大西洋鲑。本方法适用于任何发育时期、任意形态的鱼类样本。 | ||
搜索关键词: | 用于 鉴别 大西洋 虹鳟 生物 传感 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.一种用于鉴别大西洋鲑和虹鳟的生物传感检测方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一、提取待检测样品的基因组DNA,利用大西洋鲑特异性引物对,以所述待检测样品的基因组DNA为模板进行PCR反应,得到待检测样品的PCR扩增产物Ⅰ,且大西洋鲑特异性引物对各自分别于碱基序列的上游带有电化学活性标记分子和锚定标记分子,所述大西洋鲑特异引物对为如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的碱基序列;步骤二、将步骤一中得到的所述PCR扩增产物加于修饰有锚定受体的电极表面进行反应,所述锚定标记分子可被所述锚定受体捕获,以使带有锚定标记分子的PCR扩增产物被电极表面捕获;和步骤三、检测所述电化学活性标记分子的电化学信号,若存在所述电化学标记分子的电化学信号,则所述待检测样品来自于大西洋鲑;还包括:步骤四、以步骤一中得到的所述待检测样品的基因组DNA为模板,利用虹鳟特异性引物对,以所述待检测样品的基因组DNA为模板进行PCR反应,得到待检测样品的PCR扩增产物Ⅱ,其中,所述虹鳟特异性引物对也各自分别于碱基序列的上游带有电化学活性标记分子和锚定标记分子,虹鳟特异性引物对为如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的碱基序列;步骤五、将步骤四中得到的PCR扩增产物Ⅱ加入到一新的所述修饰有锚定受体的电极表面进行反应;步骤六、检测所述电化学活性标记分子的电化学信号,若存在所述电化学标记分子的电化学信号,则所述待检测样品来自于虹鳟;若在步骤六中未检测到所述电化学活性标记分子的电化学信号,而在步骤三中检测到所述电化学活性分子标记的电化学信号,则所述待检测样品来自于大西洋鲑。
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