[发明专利]分级酶解法制备含寡糖海藻有机肥的方法

摘要

本发明涉及一种分级酶解法制备含寡糖海藻有机肥的方法。将新鲜的海洋藻类植物洗净、除杂、浸泡、磨浆，并制备酶溶液，将酶溶液分次加入到海藻底料中，实现分级酶解。实验表明，本发明采用的多种酶分级酶解技术效果明显好于单一酶解以及简单的将多种酶混合酶解，而且反应时间短，极大提高了生产效率，活性成分海藻酸和寡糖含量高，整个工艺操控性强，绿色节能，环保。采用本发明制备的含寡糖的海藻有机肥海藻酸和褐藻寡糖含量均为20g/L以上,pH值为7.0‑8.5，N、P、K含量比例为1‑210.8‑1.5。

主权项

一种分级酶解法制备含寡糖海藻有机肥的方法，其特征在于包括以下步骤：1）、制备产品A：将新鲜的海洋藻类植物洗净、除杂，浸泡12‑48h后，磨浆，转入发酵罐内，在110‑150℃灭菌15‑30min，冷却至20‑35℃得到产品A，备用；并制备酶溶液：将蜡样芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌分别活化后接种到同一个种子发酵罐混合富集培养，接种量均为10%‑20%，温度为30℃‑38℃，培养10h‑24h，将发酵液离心后经过膜过滤除去菌体得到纤维素分解酶溶液甲；将嗜糖芽孢杆菌（拉丁文分类命名：Bacillus halosaccharovorans）活化后转入种子发酵罐富集培养，接种量为10%‑20%,，温度为30℃‑38℃，培养10h‑24h，将发酵液离心后经过膜过滤除去菌体得到褐藻酸降解酶溶液乙；所述的接种量是指种子液占发酵培养基的质量百分比；2）、制备产品B：按酶溶液甲和产品A的重量比为1:3‑10，将酶溶液甲加入到产品A中，控制温度为30‑40℃，用酸碱调节剂调节反应的pH值为5‑8，反应时间为2‑10h，得到产品B；3）、制备产品C：按酶溶液乙和产品B的重量比为1:3‑10，将酶溶液乙加入到产品B中，控制温度为30‑40℃，用酸碱调节剂调节反应的pH值为5‑8，反应时间为2‑10h，得到产品C；4）、制备产品D：将发酵罐内产品C温度冷却至0℃～5℃，保存2～7天，然后将温度恢复至25℃～35℃，得到产品D；5）、制备海藻有机肥：向产品D中加入硝酸钾10‑15重量份、磷酸二氢钾5‑15重量份、尿素10‑15份，搅拌使溶解均匀得到100重量份的海藻有机肥；其中嗜糖芽孢杆菌，其在保藏单位的简称为YIC～Alg3，其保藏号为CGMCC No12155。