[发明专利]大肠杆菌工程菌及其催化马来酸合成富马酸的方法在审
申请号: | 201610575998.7 | 申请日: | 2016-07-20 |
公开(公告)号: | CN106222122A | 公开(公告)日: | 2016-12-14 |
发明(设计)人: | 周哲敏;刘文茂;周丽;崔文璟;刘中美 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P7/46;C12R1/19 |
代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙)32257 | 代理人: | 杨慧林 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种可高产富马酸的大肠杆菌工程菌,通过敲除大肠杆菌的延胡索酸酶编码基因fumA和fumC,并转化来源于粘质沙雷氏菌的马来酸顺反异构酶基因得到。本发明还公开了上述大肠杆菌工程菌催化马来酸合成富马酸的方法:发酵培养大肠杆菌工程菌,当OD600达到40‑80时对大肠杆菌工程菌进行高密度诱导表达,将得到的发酵液生化催化马来酸,得到富马酸。本发明利用Red同源重组技术敲除大肠杆菌中的fumA和fumC基因,切断其富马酸到L‑苹果酸的代谢通路,然后表达来源于粘质沙雷氏菌的马来酸顺反异构酶,获得的基因工程菌株可高效转化马来酸底物合成高纯度富马酸,几乎不合成L‑苹果酸副产物,为全细胞法催化马来酸生产富马酸的工业化提供依据。 | ||
搜索关键词: | 大肠杆菌 工程 及其 催化 马来 合成 富马酸 方法 | ||
【主权项】:
一种可高产富马酸的大肠杆菌工程菌,其特征在于:所述工程菌通过敲除大肠杆菌的延胡索酸酶编码基因,并在所得的重组菌株中表达马来酸顺反异构酶基因得到。
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