[发明专利]膝柄木胚乳诱导愈伤组织方法有效
| 申请号： | 201610559084.1 | 申请日： | 2016-07-15 |
| 公开（公告）号： | CN106171990B | 公开（公告）日： | 2018-08-28 |
| 发明（设计）人： | 莫竹承;刘钰;杨明柳;陈国勇;张秀国 | 申请（专利权）人： | 莫竹承 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 靳浩 |
| 地址： | 536006 广西壮族自治*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种膝柄木胚乳诱导愈伤组织方法，选择膝柄木胚乳作为外植体；配制初始培养基，在MS培养基中加入萘乙酸和6‑苄氨基嘌呤，并调节pH至5.8‑6.0；将膝柄木胚乳接种于初始培养基中，在黑暗环境中培养6‑8天，之后培养6‑8天，每天用光照强度为1500～2000LX灯光照射9‑12h，培养温度控制在25℃，得到初愈伤组织；配制继代培养基，在MS培养基中加入萘乙酸和6‑苄氨基嘌呤；将所述初愈伤组织接种于继代培养基中培养10‑15天，每天用光照强度为1500～2000LX灯光照射9‑12h，培养温度控制在25℃，即诱导完成。本发明实现了濒危植物膝柄木抢救保护技术的突破。 | ||
| 搜索关键词： | 膝柄木 胚乳 诱导愈伤组织 初始培养基 继代培养基 苄氨基嘌呤 灯光照射 愈伤组织 萘乙酸 光照 接种 配制 濒危植物 黑暗环境 外植体 诱导 | ||
【主权项】：
1.一种膝柄木胚乳诱导愈伤组织方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、选择膝柄木胚乳作为外植体；步骤二、配制初始培养基，在MS培养基中加入0.3‑1mg/L的萘乙酸和0.1‑0.5mg/L的6‑苄氨基嘌呤，并调节pH至5.8‑6.0，并灭菌；步骤三、将膝柄木胚乳接种于初始培养基中，在黑暗环境中培养6‑8天，之后培养6‑8天，每天用光照强度为1500～2000LX灯光照射9‑12h，培养温度控制在25℃，得到初愈伤组织；步骤四、配制继代培养基，在MS培养基中加入0.08‑0.4mg/L的萘乙酸和0.08‑0.4mg/L的6‑苄氨基嘌呤，并灭菌；步骤五、将所述初愈伤组织接种于继代培养基中培养10‑15天，每天用光照强度为1500～2000LX灯光照射9‑12h，培养温度控制在25℃，即诱导完成；其中，初始培养基和继代培养基均加入有琼脂粉2‑6g/L，以及蔗糖；其中初始培养基和继代培养基中加入蔗糖的量均占所加入MS培养基质量分数的1‑6％。
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