[发明专利]一种利用禽畜粪便制备复合微生物生态菌肥及其方法

摘要

本发明公开了一种利用禽畜粪便制备复合微生物生态菌肥及其方法，将自土壤和猪粪便中分离得到圆褐固氮菌和恶臭假单胞菌进行氮离子注入诱变，筛选高活性突变菌株；将枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌，圆褐固氮菌和恶臭假单胞菌、酵母菌、乳酸链球菌六株菌株分别单独发酵，获得发酵菌液；按照1～3：5～8：1～2：2～3：1.5～3：3～5的体积比混合，制得复合菌液，按质量浓度2～5％向上述复合菌剂中加入甘蔗糖蜜的新鲜培养基质；按质量浓度2～2.5‰向复合菌液中加入山梨酸钾，搅拌均匀；添加0.4～1g/L的凹凸棒土，搅拌均匀，即制得活性菌剂；在化粪池内投入上述活性菌剂，待粪便分解处理完成后，干湿分离，固体部分为复合微生物菌肥。

主权项

1.一种利用禽畜粪便制备复合微生物生态菌肥的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)辐照诱变：将自土壤和猪粪便中分离得到圆褐固氮菌A.chroococcumcas1和恶臭假单胞菌Pseudomonasputida进行氮离子注入诱变，筛选高活性突变菌株；(2)单株菌发酵：将枯草芽孢杆菌BacillussubtilisCZ9、侧孢芽孢杆菌BacillusLateraporusHF12、圆褐固氮菌A.chroococcumcas1、恶臭假单胞菌P.putidacas8、酵母菌SporobolomycesroseusCZ3、乳酸链球菌StreptococcuslactisCZ5六株菌株分别单独发酵，获得发酵菌液；步骤(2)中，枯草芽孢杆菌B.subtilisCZ9和侧孢芽孢杆菌BacillusLateraporusHF12采用LBG培养基培养24‑36h：接种量为1～2％，摇床转速为180～200rpm，所述LBG培养基包括葡萄糖50g，蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠10g，纯水1000ml；步骤(2)中，圆褐固氮菌A.chroococcumcas1采用Ashby培养基培养24～36h：接种量为1～2％，摇床转速为180～200rpm，所述Ashby培养基包括葡萄糖10g，磷酸氢二钾0.2g，硫酸镁0.2g，氯化钠0.2g，硫酸钙0.2g，碳酸钙5g，纯水1000ml；步骤(2)中，恶臭假单胞菌P.putidacas8cas8采用LB培养基培养24～36h：接种量为1～2％，摇床转速为180～200rpm，所述LB培养基包括胰蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠10g，纯水1000ml；步骤(2)中，酵母菌SporobolomycesroseusCZ3采用YPD培养基培养24～36h：接种量为1～2％，摇床转速为180～200rpm，所述YPD培养基包括酵母提取物10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，纯水1000ml；步骤(2)中，乳酸链球菌StreptococcuslactisCZ5采用发酵培养基培养24～36h：接种量为1～2％，摇床转速为180～200rpm，所述发酵培养基包括蔗糖10g，蛋白胨20g，酵母膏10g，磷酸二氢钾30g，氯化钠2g，硫酸镁0.2g，纯水1000ml；(3)复合菌液制备：上述各单菌株发酵结束后，将枯草芽孢杆菌B.subtilisCZ9、侧孢芽孢杆菌BacillusLateraporusHF12、圆褐固氮菌A.chroococcumcas1、恶臭假单胞菌P.putidacas8、酵母菌SporobolomycesroseusCZ3、乳酸链球菌StreptococcuslactisCZ5的新鲜发酵菌液，按照1～3：5～8：1～2：2～3：1.5～3：3～5的体积比混合，制得复合菌液，其中有效活菌数为1.35×10⁹～2.4×10⁹cfu/ml；(4)新鲜培养基添加：按质量浓度2～5％向上述复合菌剂中加入甘蔗糖蜜新鲜培养基质；(5)保护剂添加：按质量浓度2～2.5‰向步骤(4)的液体中加入山梨酸钾，搅拌均匀；(6)载体添加：向步骤(5)的菌液中添加0.4～1g/L的凹凸棒土，搅拌均匀，即制得活性菌剂；(7)复合微生物生态菌肥制备：在化粪池内投入上述活性菌剂，待粪便分解处理完成后，干湿分离，固体部分为复合微生物菌肥。