[发明专利]一种测定乐舒洗液中黄柏碱含量的SPE‑HPLC法

摘要

本发明涉及一种测定乐舒洗液中黄柏碱含量的SPE‑HPLC法，包括以下步骤A、对照品溶液的制备；B、供试品溶液的制备采用固相萃取方法制备供试品溶液；C、液相色谱检测D、标准曲线的建立；E、样品测定。本发明选用固相萃取法制备供试液，可获得近100%的萃取回收率，并有效除去供试品中的无机盐及有机杂质，有利于延长色谱柱使用寿命。固相萃取法可批量处理样品，易于实现自动化，提高工作效率。现有文献报道的方法大多都采用C18色谱柱，而本方法选用氨基柱为分析柱，与之比较，本方法柱效高，峰型尖锐，干扰少。本方法操作简便，结果准确，重复性好，分析过程中杂质干扰少。

主权项

一种测定乐舒洗液中黄柏碱含量的SPE‑HPLC法，其特征在于：包括以下步骤：A、对照品溶液的制备：称取黄柏碱对照品，用甲醇定容，制成对照品储备液，将黄柏碱对照品储备液逐级稀释，制备成系列浓度对照品工作液；B、供试品溶液的制备：B1、取乐舒洗液超声处理，摇匀，滤过，取滤液备用；B2、取滤液过已活化的Bond Elut plexa PCX混合型强阳离子交换小柱，依次用0.5mol·L‑1盐酸、甲醇和体积浓度50%甲醇溶液洗涤，弃去洗液，抽干，最后用氨水‑甲醇溶液洗脱，氨水‑甲醇溶液中氨水与甲醇的体积比为2∶8，控制流速在1～1.5 mL·min‑1，取洗脱液置于88～92℃水浴中空气吹干，精密加入流动相，涡旋震荡使溶解残渣，即得供试品溶液；C、液相色谱检测：待仪器状态稳定后，用步骤A制备的对照品工作液进样，液相色谱检测，在此基础上，对步骤B制备的供试品溶液进行液相色谱检测；液相色谱柱选用Platisil‑NH2 柱，5.0 μm，250 mm×4.6 mm；检测条件：柱温：30℃；测定波长：286 nm；进样量：15μL或20 μL；流动相：0.3％三乙胺‑四氢呋喃‑乙腈溶液，其中0.3％三乙胺、四氢呋喃、乙腈的体积比为18∶12∶70，所述的0.3%三乙胺用磷酸调pH值为3.82；流速：1.0 mL·min‑1；D、标准曲线的建立：以对照品工作液的进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；E、样品测定：将测定的供试品溶液的黄柏碱的峰面积，代入标准曲线方程，计算得到供试品溶液中的黄柏碱含量。