[发明专利]一种枯草芽孢杆菌中药饲料添加剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种枯草芽孢杆菌中药饲料添加剂的制备方法，该方法，将饲用枯草芽孢杆菌活化、扩大培养，得种子液；取葛根、黄精和饭麦石，超微粉碎，灭菌，得灭菌后中药粉A；将种子液接种到培养液中，培养8h，得到菌液；在菌液中加入灭菌后中药粉A，继续培养，得到二级种子液；取陈皮、鱼腥草和山楂，超微粉碎，灭菌，得到灭菌后中药粉B；将二级种子液接种到液体发酵培养基中，培养，得发酵液；在发酵液中添加灭菌后中药粉B，继续发酵10‑15h，得最终发酵液；将最终发酵液真空浓缩、雾化、热空气进行并流干燥，干燥物料经旋风分离器引出、回收，制备出枯草芽孢杆菌中药饲料添加剂。所添加剂含水量小，活菌数7000‑18000亿/g，菌种活性高，具有广阔的市场前景。

主权项

一种枯草芽孢杆菌中药饲料添加剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、将饲用枯草芽孢杆菌接种在斜面种子培养基上，35‑37℃培养48h；所述斜面种子培养基中各成分的质量百分比含量为：葡萄糖0.5‑1.5%，蛋白胨0.2‑2%，牛肉膏0.5‑1.5%，酵母膏0.5‑1.5%，氯化钠0.5%，琼脂1.5‑2%，余量为水；步骤二、从培养的新鲜斜面上挑取2‑4环菌苔接种于装有50ml液体扩大培养基的250ml三角瓶中，35‑37℃，180‑240rpm摇床振荡培养16‑24h，得到种子液，备用；所述液体扩大培养基中各成分的质量百分比含量为：葡萄糖0.5‑1.5%，蛋白胨0.2‑2%，牛肉膏0.5‑1.5%，酵母膏0.5‑1.5%，氯化钠0.5%，余量为水；步骤三、按照质量比为2:1:0.2的比例取葛根、黄精和饭麦石，置于超微粉碎机中进行超微粉碎，过60‑80目筛，将所得中药粉进行高温湿热灭菌，冷却至室温，得到灭菌后中药粉A，备用；步骤四、将上述培养的种子液接种到装有3L培养液的5L发酵罐中，接种量为培养液体积的5‑15%；接种结束后，于150‑250rpm，1:1通风量，pH6.5‑7.0，35‑37℃条件下培养8h后，得到菌液；在菌液中加入其重量6%‑7%的灭菌后中药粉，搅拌均匀后，继续在于150‑250rpm，1:1通风量，pH6.5‑7.0，35‑37℃条件下培养8‑12h，得到二级种子液，备用；所述培养液中各成分的质量百分比含量为：葡萄糖0.5‑1.5%，豆饼粉0.5‑2.0%，蛋白胨0.5‑2.5%，硫酸铵0.25‑1.5%，磷酸氢二钠 0.05‑0.20%，磷酸二氢钠0.05‑0.20%，硫酸镁0.05‑0.5%，氯化钙0.01‑0.10%，余量为水；步骤五、按质量比为5:2:1的比例取陈皮、鱼腥草和山楂，置于超微粉碎机中进行超微粉碎，过60‑80目筛，将所得中药粉进行高温湿热灭菌，冷却至室温，得到灭菌后中药粉B，备用；步骤六、将培养的二级种子液接种于装有30‑35L液体发酵培养基的50L发酵罐中，接种量为发酵培养基体积的5‑15%；接种结束后按1:0.6‑0.75通风量，150‑220rpm，pH6.5‑7.0，35‑37℃培养20‑25h，得到发酵液；在发酵液中添加其质量2%的灭菌后中药粉B，在1:0.6‑0.75通风量，150‑220rpm，pH6.5‑7.0，35‑37℃继续发酵10‑15h得到最终发酵液，备用；所述液体发酵培养基中各成分的质量百分比含量为：葡萄糖1.0‑3.0%，淀粉0.5‑2.0%，豆饼粉0.5‑2.0%，蛋白胨0.2‑2%，硫酸铵0.25‑1.5%；碳酸钙0.01‑0.05%，磷酸氢二钾0.01‑0.05%，磷酸锰0.01‑0.05%，氯化钙0.01‑0.05%，余量为水；步骤七、将所得最终发酵液用泵输送至两效真空浓缩设备中，一效温度75‑80℃，真空度0.05‑0.055MPa，二效50‑55℃，真空度0.058‑0.065MPa，浓缩比为3‑4:1，浓缩结束后按10‑20%比例加入淀粉混合均匀，用泵将物料输送至喷雾干燥塔顶部，由离心式雾化器在15000‑18000rpm下进行雾化，用进口温度为140‑155℃的热空气进行并流干燥，干燥物料经旋风分离器引出后从接料桶中回收，即制备出枯草芽孢杆菌中药饲料添加剂。