[发明专利]一种大鼠器官型脊髓片培养液的配制方法

摘要

本发明公开了一种大鼠器官型脊髓片培养液的配制方法，1)将DMEM/F12培养基干粉溶解在双蒸水中，加入NaHCO₃，调节培养基溶液的pH，加入双蒸水将培养基溶液定容，过滤除菌，装瓶分装，保存备用；2)冷冻胎牛血清全融后，置于水浴锅中灭活，无菌离心管分装，保存备用；3)按照体积比取DMEM/F12培养基85‑95ml，向培养基中加入5‑15ml胎牛血清，即得大鼠器官型脊髓片培养液；4)将培养液加入到NaOH和NaHCO₃配制的溶液中保存。本发明大鼠器官型脊髓片培养液的配制方法具有简化培养液组分，减低实验成本，简便省时、易操作等优点，采用该培养液培养的脊髓片更容易存活，而且生长迅速。

主权项

一种大鼠器官型脊髓片培养液的配制方法，其特征在于，包括下述步骤：1)将15.6g DMEM/F12培养基干粉充分溶解在900ml的双蒸水中，然后加入1.2g NaHCO₃，调节培养基溶液的pH为7.4，加入双蒸水将培养基溶液定容至1000ml，然后过滤除菌，用250ml/瓶分装，4℃保存备用；2)将胎牛血清从冷冻箱中取出后，先置于4℃的冰箱中使其溶解，然后在室温下使其全融，在溶解的过程中规则的摇晃使其混合均匀，将血清置于56℃的水浴锅中灭活30分钟，然后用10ml的无菌离心管分装成10ml/支，在‑20℃的条件下保存备用；3)按照体积比取步骤1)配制的DMEM/F12培养基85‑95ml，向培养基中加入5‑15ml的步骤2)配制的胎牛血清，即得大鼠器官型脊髓片培养液；4)在配制的大鼠器官型脊髓片培养液中加入NaOH或NaHCO₃溶液，调pH值至7.4，于4℃保存。