[发明专利]一种高效、准确检测芍药中褪黑素含量的方法

摘要

本发明涉及一种高效、准确检测芍药中褪黑素含量的方法。该方法包括对照品溶液的制备、待测样品溶液的制备和高效液相色谱‑串联质谱检测的步骤。本发明检测芍药中的褪黑素所得色谱峰与其它组分色谱峰能达到基线分离，呈对称的高斯峰，峰型良好，能满足定性和定量要求；本发明所提供的芍药中褪黑素含量检测方法操作简便、灵敏度高、专一性强、稳定性好、结果准确可靠。

主权项

1.一种检测芍药中褪黑素含量的方法，包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备：取对照品褪黑素2mg，置于100mL容量瓶中，加80％的甲醇水溶液充分溶解，并稀释至刻度，摇匀，0.22μm微孔滤膜过滤，作为对照品溶液；(2)待测样品溶液的制备：将芍药样品用研钵研磨均匀，取1g样品置于10mL试管中，加入5mL甲醇溶液，4℃冰箱避光静置1h，在黑暗中超声处理，随后在4℃下10,000g离心15min；收集上清并用0.22μm微孔滤膜过滤，置于新的2mL试管，真空浓缩仪浓缩，将浓缩后的物质用0.8mL、80％甲醇水溶液复溶，振荡15min，通过0.22μm滤膜过滤后作为待测样品溶液；(3)高效液相色谱‑串联质谱检测；所述高效液相色谱‑串联质谱中的色谱及质谱条件如下，色谱条件为：色谱柱：Thermo AQ‑C18，2.1mm×5mm，2.6μm；流动相：乙腈和0.5％甲酸水溶液，采用梯度洗脱；柱温：30℃；进样量：5μL；流速0.4mL/min；UV灯关，MS分时段设置流路，在0～2.5min和15～25min时间段设置成To waste，在2.5～15min时间段设置成MRM；质谱条件为：离子源：电喷雾离子源；扫描模式：MRM；离子检测方式：正离子；干燥器温度：300℃；干燥气流速：10L/min；雾化气压力：15psi；鞘气温度：250℃；鞘气流速：7L/min；毛细管电压：4000V；喷雾电压：500V；检测离子：母离子为m/z233.2，子离子为m/z174.2、m/z159.2。