[发明专利]一种快速检测中药材中桔霉素含量的方法

摘要

本发明属于分析测试技术领域，涉及桔霉素的检测方法，尤其是涉及一种快速检测中药材中桔霉素含量的方法。本发明所述方法包括以下步骤：改进的QuEChERS法萃取；采用超高效液相色谱‑三重四级杆质谱联用仪对待测液进行检测；桔霉素标准溶液的配制；桔霉素定性定量方法的建立。待测样品经QuEChERS萃取、超高效液相色谱‑三重四级杆质谱联用(UPLC‑MS/MS)分析，采用外标法，在电喷雾离子源电离和多反应监测模式条件下进行定量测定。实验结果表明，本方法灵敏度高、稳定性好，适用于大量样品中桔霉素残留的准确快速检测，适用于中药材中桔霉素残留的监测。

主权项

一种快速检测中药材中桔霉素含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)QuEChERS萃取：取5.00g中药材样品，粉碎研磨，得粒径为0.02mm的样品粉末，加入100mL锥形瓶中；容量瓶中配制50mL乙腈‑水(体积比为75:25)溶液，加入到所述锥形瓶中，350r/min震荡25min，静置沉淀，过滤，取上清液过净化柱，浓缩过0.22μm滤膜后待测；(2)采用超高效液相色谱‑三重四级杆质谱联用仪对待测液进行检测；色谱条件为：采用ACQUITY UPLC BEH C18(50mm×2.1mm×1.7μm)色谱柱；流动相为80％乙腈和20％5mM乙酸铵缓冲盐溶液；进样体积：10.0μL；流速：0.3mL/min；柱温40.0℃；样品室温度：25.8℃；质谱条件为：采用Waters XEVO TQD三重四级杆质谱联用仪；电喷雾离子源为正离子模式(ESI+)，扫描方式选用多反应监测(MRM)，毛细管电压为3.5kV，离子源温度设为152℃，脱溶剂气温度为597℃，脱溶剂气流量1000L/h，锥孔气流速1L/h，雾化压力0.5MPa，碰撞气流速为0.2mL/min；桔霉素(CIT)的质谱(MS/MS)参数设置：母离子：m/z 251.1；锥孔电压45V；碎片离子1：m/z 157.0，碰撞电压23V；碎片离子2：m/z 189.0，碰撞电压12V；碎片离子3：m/z 233.2，碰撞电压14V；(3)桔霉素标准溶液的配制：准确称取5.0mg桔霉素(CIT)标准品于100.00mL容量瓶中，用乙腈‑水(体积比为6:4)溶液定容，配制成50.0mg/L的储备液，密封储存于‑4℃冰箱中备用；(4)桔霉素定性定量方法的建立：取出桔霉素标准溶液的储备液，逐级稀释成质量浓度梯度为0.5、1.0、2.0、5.0、10.0ng/mL的标准溶液，采用步骤(2)所述方法进行测定，以质量浓度为横坐标x，以峰面积为纵坐标Y，绘制出桔霉素标准工作曲线；从所述标准工作曲线中求出待测样品中桔霉素的含量。