[发明专利]一种过氧化物纳米酶及其制备方法

摘要

一种过氧化物纳米酶及其制备方法，属于纳米生物技术领域。是以金纳米粒子为载体，利用生物活性五肽(URGDC)进行自组装，五肽分子中巯基与金纳米粒子配位共价偶联，得到具有高GPx活性的过氧化物纳米酶。此方法简便易于操作，并且具有良好的稳定性。生物活性五肽的氨基酸序列为Sec‑Arg‑Gly‑Asp‑Cys(简称URGDC)。其中Sec(U)中含有酶的活性中心；Arg‑Gly‑Asp(RGD)能促进纳米酶与底物的结合，Cys(C)侧链中的巯基可以和金纳米粒子共价连接。金纳米粒子的应用是作为一种载体固定生物活性五肽，促进纳米酶与底物的充分接触，提高谷胱甘肽过氧化物酶的活力。

主权项

一种过氧化物纳米酶的制备方法，其步骤如下：(1)利用柠檬酸钠还原四氯金酸得到柠檬酸钠包覆的金纳米粒子溶胶，然后将该金纳米粒子溶液于8000～12000rpm离心20～30min，沉淀再以高纯水溶解并稀释得到金纳米粒子溶液，其最大等离子体共振吸收峰λ_max≈520nm处的吸光度值在0.8～1.0，制备得到金溶胶储备液，储备液的浓度为1.26～1.57nM；(2)取1mL步骤(1)制备得到的金溶胶储备液，用10mM磷酸缓冲液PBS调节其pH＝8.0～9.0，然后向其中加入6～30μL、10^‑3M的生物活性五肽URGDC，摇匀后，4℃静置20～30小时，即得到具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的过氧化物纳米酶。