[发明专利]一种单分散强磁性免疫纳米微球及其制备方法

摘要

本发明公开了一种单分散强磁性免疫纳米微球，所述单分散强磁性免疫纳米微球的粒径为5nm‑5um。本发明还公开了一种单分散强磁性免疫纳米微球的制备方法，包括以下步骤步骤一、四氧化三铁纳米颗粒的制备；步骤二、单分散硅羟基磁性纳米微球的制备；步骤三、单分散氨基化磁性纳米微球的制备；步骤四、单分散强磁性免疫纳米微球的制备。本发明的单分散强磁性免疫纳米微球及其制备方法具有较好的超顺磁性，磁含量高、分散性好、无团聚现象，形貌规则标准，粒径统一可控，易功能化修饰等优点。

主权项

一种单分散强磁性免疫纳米微球的制备方法，所述单分散强磁性免疫纳米微球的粒径为5nm‑5um,其特征在于，包括以下步骤：步骤一：S1、取浓度均为0.1～3mol/L的Fe3+的盐溶液和Fe2+的盐溶液，按体积比为1：1～10:1混合，取混合液10‑100mL，加入5‑500mL含有0.1％‑10％乳化剂的水溶液中，充分混合均匀，得到混合液1；S2、在混合液1中加入20％‑80％的聚乙二醇‑6000水溶液20‑100mL，得到混合液2；S3、将混合液2加热至20～50℃，同时缓慢滴加浓度为20％～75％的氨水稀释液0.1～0.5毫升，保持温度持续反应1～3小时，得到颗粒1；S4、分别用无水乙醇和超纯水各清洗3次颗粒1，将颗粒1进行磁分离技术，在65℃的温度下干燥2小时，即得到了四氧化三铁纳米颗粒；步骤二：S1、将所述四氧化三铁纳米颗粒分散在含有1％‑10％十二烷基苯磺酸钠水溶液中，再加入20‑200mL浓度为20％‑80％的醇溶液中，充分混合均匀，得到混合液3；S2、在混合液3中缓慢滴加5～30毫升浓度为0.1～1mol/l的四乙氧基硅烷溶液，反应1～10小时后再次加入浓度为0.1～0.5mol/l的氨水溶液调节PH值到8～12，得到混合液4；S3、将混合液4继续加热到20～70℃持续反应3～5小时，反应结束后，得到颗粒2；S4、将颗粒2进行磁分离技术出表面经过硅羟基修饰的颗粒，用超纯水清洗3次，在65℃真空环境下干燥2小时，即得到单分散硅羟基磁性纳米微球；步骤三：S1、将单分散硅羟基磁性纳米微球分散在浓度为50～500毫升20％‑80％的的乙醇溶液中，充分混合均匀，得到混合液5；S2、在混合液5中加入10～100微升3‑氨丙基三乙氧基硅烷，使其在25～60℃的温度下反应1～10小时，反应结束后，得到颗粒3；S3、将颗粒3进行磁分离技术，用75％的乙醇溶液清洗3次，在65℃真空环境下干燥2小时，即得到单分散氨基化磁性纳米微球；步骤四：S1、将单分散氨基化磁性纳米微球分散在0.1‑10毫升PBS溶液中，加入0.1‑10毫升质量分数为10％的戊二醛溶液，充分混合均匀，得到混合液8，让混合液8持续反应1～3小时，即可得颗粒6；S2、将颗粒6再次分散在0.1‑10毫升PBS溶液中，加入1～100微升待检测物的相应抗体，进行孵育1‑3小时，得到颗粒7；S3、将颗粒7用PBS清洗2次后，加入到甘氨酸溶液中，使其混合反应，得到颗粒8，将颗粒8用PBS清洗2次后，再经过磁分离技术，既得到单分散强磁性免疫纳米微球。