[发明专利]污水和污泥中12种典型抗生素的同时检测方法

摘要

本发明公开了一种污水和污泥中12种典型抗生素的同时检测方法，包括：对污泥进行冷冻干燥，研磨过筛取样，加替代物，加入甲醇和Na₂EDTA‑McIlvaine缓冲液，混匀超声离心提取上清液，将重复三次提取的上清液合并后用超纯水定容，调节pH为3.0；抽滤水样，用超纯水稀释并调节pH为3.0，加入替代物和Na₂EDTA·2H₂O，放置一个小时；固相萃取采用SAX‑HLB串联系统，用甲醇、超纯水和酸性超纯水活化，然后上柱、淋洗、甲醇洗脱；洗脱液氮吹复溶，用优化好的液质参数定量。本发明优化的超声萃取、固相萃取、液质联用技术能实现复杂基质中抗生素的有效提取和准确定量，可应用于广泛的污水和污泥样品的测定。

主权项

污水和污泥中12种典型抗生素的同时检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、取一定量的污泥预冻后冷冻干燥24h，研磨过筛后称取1g干污泥，将该干污泥放入50mL的塑料离心管中，加入100μL质量体积浓度为1mg/L的¹³C₃‑咖啡因作为替代物；步骤二、向上述塑料离心管中加入7.5mL的甲醇和7.5mL且pH为4.0的Na₂EDTA‑McIlvaine缓冲液，混匀振荡1min，超声萃取15min，4000rpm离心5min，取出上清液，备用，再重复两次上述操作；步骤三、合并步骤二获得的上清液，并用超纯水定容到500mL，然后用浓盐酸调节pH为3.0，获得污泥的稀释样品；步骤四、取100～500mL的污水水样，用0.7μm的玻璃纤维滤膜进行过滤，超纯水稀释到1000mL，用浓盐酸调节pH值为3.0，加入100μL质量体积浓度为1mg/L的¹³C₃‑咖啡因作为替代物，加入0.5g Na₂EDTA·2H₂O，放置一个小时，间歇振荡以保持Na₂EDTA·2H₂O的溶解状态，完成污水水样的前处理；步骤五、将步骤三获得的污泥的稀释样品和经过步骤四前处理后的污水样品分别进行固相萃取，用SAX‑HLB小柱串联系统进行污水样品和污泥的稀释样品的固相萃取，所述固相萃取的过程是：依次用6mL甲醇、6mL超纯水和6mL pH为3.0的超纯水进行活化，以5mL/min的流速上柱，拆掉SAX小柱后用5mL的超纯水淋洗HLB小柱，最后用8mL的甲醇洗脱得到洗脱液；步骤六、将步骤五得到的洗脱液在40℃水浴条件下，氮吹至其中的溶剂完全挥发，加入内标物，再用1mL的10％乙腈+90％0.3％甲酸溶液复溶，得到检测样品；步骤七、分别以乙腈和0.3％甲酸溶液为流动相，利用超高效液相色谱串联质谱仪对检测样品进行12种目标抗生素的定量分析。