[发明专利]一种基于聚集诱导发光和核酸适配体的检测方法

摘要

本发明公开了一种基于聚集诱导发光和核酸适配体的检测方法，属于生物分析技术领域。解决了现有技术中基于核酸适配体的检测方法灵敏度低、稳定性差、步骤繁琐、成本高等问题。本发明的方法第一次将具有聚集诱导发光性质的分子共价修饰于核酸适配体的两端，利用核酸适配体和细胞(或蛋白质)的特异性结合，使具有聚集诱导发光分子发出荧光信号，从而实现对细胞或蛋白质的快速、简便、廉价、稳定、灵敏、高选择性的检测，及对细胞的选择性成像。且该检测方法给出的是荧光增强的信号，不需要信号扩增就能达到很低的检测限，也不用另外修饰淬灭基团或合成淬灭材料，只需要探针和检测物两种物质，即混即测。

主权项

1.一种基于聚集诱导发光和核酸适配体的检测方法，其特征在于，步骤如下：步骤一、将两端修饰了氨基的适配体溶于溶剂中，得到第一溶液；所述适配体为细胞适配体或者蛋白适配体，溶剂为碳酸氢钠水溶液或碳酸氢钾水溶液；步骤二、将化合物1溶于溶剂中，得到第二溶液；所述化合物1的结构式为所述溶剂为二甲基亚砜或二甲基甲酰胺；步骤三、将第一溶液和第二溶液混合均匀，得到混合溶液，在35～40℃中放置12～36h，离心，取上清液通过反相高效液相色谱提纯，收集产物，0℃以下真空干燥后，得到无色固体，即为两端共价修饰具有AIE性质分子的核酸适配体；所述混合溶液中，两端修饰了氨基的适配体与化合物1的摩尔比小于1:2；步骤四、将步骤三得到的两端共价修饰具有AIE性质分子的核酸适配体加入去离子水中，得到母液；步骤五、将步骤四中的母液、待测物与pH值为7.4的磷酸盐缓冲溶液或者70～90％的血清混合，混合均匀后，检测混合物的荧光强度；所述待测物为待测细胞或者待测蛋白质，两端共价修饰具有AIE性质分子的核酸适配体的检测浓度为2～5μM；或者，将步骤四中的母液、待测细胞与pH值为7.4的磷酸盐缓冲溶液或者70～90％的血清混合，混合均匀后，在2～8℃下放置20～60min，取混合物滴在载玻片上，利用激光扫描共聚焦显微镜拍摄细胞的荧光照片；所述两端共价修饰具有AIE性质分子的核酸适配体的检测浓度为2～5μM。