[发明专利]一种重组质粒及重组酵母菌株及其构建方法和应用

摘要

本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种重组质粒及重组酵母菌株及其构建方法和应用。本发明所述重组质粒包含如下基因片段：终止子ADH1t、β‑胡萝卜素羟化酶基因crtZ、启动子FBA1p或TEF1p、启动子TDH3p、β‑胡萝卜素酮化酶基因crtW、终止子TDH2t顺次拼接而成的基因片段。本发明通过选择特定的终止子、启动子以及外源crtZ和crtW，组成了可生产虾青素产量的基因片段，由此获得了重组质粒，将其转化至特定的酿酒酵母菌株中，保证了虾青素的较高产量，为虾青素的异源微生物生产提供更加经济、效率、简便的方式。

主权项

1.一种重组质粒，其特征在于，包含如下基因片段：终止子ADH1t、β‑胡萝卜素羟化酶基因crtZ、启动子FBA1p、启动子TDH3p、β‑胡萝卜素酮化酶基因crtW、终止子TDH2t顺次拼接而成的基因片段1，或终止子ADH1t、β‑胡萝卜素羟化酶基因crtZ、启动子TEF1p、启动子TDH3p、β‑胡萝卜素酮化酶基因crtW、终止子TDH2t顺次拼接而成的基因片段2；所述β‑胡萝卜素羟化酶基因crtZ来源于：产碱杆菌或硫化叶菌，序列如SEQ ID NO:2所示或如SEQ ID NO:6所示；所述β‑胡萝卜素酮化酶基因crtW来源于短波单胞菌，序列如SEQ ID NO:17所示。