[发明专利]一种基于正相和反相高效液相色谱联用测定5-羟甲基糠醛及其衍生物的方法

摘要

本发明公开了一种基于正相和反相高效液相色谱联用测定5‑羟甲基糠醛及其衍生物的方法。本发明是基于正相和反相高效液相色谱联用测定5‑羟甲基糠醛、2，5‑呋喃二甲醇、2，5‑呋喃二甲醛、5‑羟甲基‑2‑糠酸、5‑甲酰基‑2‑糠酸和2，5‑呋喃二甲酸的方法。采用Bio‑Rad Aminex HPX‑87H(300mm×7.8mm)正相色谱柱，通过硫酸等度洗脱，使用示差折光检测器，温度为35℃，定量测定2，5‑呋喃二甲醇、2，5‑呋喃二甲酸、5‑羟甲基糠醛和2，5‑呋喃二甲醛；采用Zorbax Eclipse XDS‑C18(300mm×4.6mm)反相色谱柱，通过乙腈和醋酸二元梯度洗脱，使用可变波长检测器，紫外波长为275nm，定量测定5‑甲酰基‑2‑糠酸和5‑羟甲基‑2‑糠酸。通过正相和反相高效液相色谱联用，定量测定6种物质，显著提高了对上述呋喃类化合物的分离度及检测准确度。

主权项

1.一种基于正相和反相高效液相色谱联用测定5‑羟甲基糠醛及其衍生物的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)高效液相色谱系统与色谱条件：正相色谱：美国Agilent1260型高效液相色谱仪，采用Bio‑Rad Aminex HPX‑87H 300mm×7.8mm正相色谱柱带保护柱30mm×4.6mm，柱温55℃，自动上样，进样体积10.0μL，以5mmol/L H2SO4为流动相，流速为0.6mL/min；检测器为示差折光检测器，检测器温度为35℃，采用色谱峰面积积分法测定各组分的含量；反相色谱：美国Agilent1100型高效液相色谱仪，采用Zorbax Eclipse XDS‑C18 300mm×4.6mm反相色谱柱带保护柱3.0mm×4.6mm，柱温30℃，自动上样，进样体积10.0μL；以100％乙腈和1.5％醋酸为流动相，流速为0.6mL/min，在0min～20min内乙腈浓度从5％升至50％，醋酸浓度从95％降至50％；检测器为可变波长检测器(VWD)，检测波长为275nm，采用色谱峰面积积分法测定各组分的含量；(2)色谱联用测定5‑羟甲基糠醛及其衍生物：将2,5‑呋喃二甲醇、5‑羟甲基糠醛、2,5‑呋喃二甲醛、5‑羟甲基‑2‑糠酸、5‑甲酰基‑2‑糠酸和2,5‑呋喃二甲酸标准品配制成0.4‑1.0g/L的标准溶液；在正相色谱上，5‑羟甲基‑2‑糠酸的出峰时间与5‑甲酰基‑2‑糠酸的出峰时间重叠，导致两种物质无法实现完全分离；在反相色谱上，2,5‑呋喃二甲醇的出峰时间与5‑羟甲基糠醛的出峰时间重叠，导致两种物质无法实现完全分离；通过正相和反相高效液相色谱的联用，最终实现对5‑羟甲基糠醛、2,5‑呋喃二甲醇、2,5‑呋喃二甲醛、5‑羟甲基‑2‑糠酸、5‑甲酰基‑2‑糠酸和2,5‑呋喃二甲酸的快速、精确的分离和定量测定。