[发明专利]检测单细胞中核酸的微流控芯片及检测单细胞中核酸的方法

摘要

本发明属于核酸检测分析技术领域，具体涉及一种利用分支链DNA信号放大技术检测单细胞中核酸的微流控芯片。芯片上均布有多个单元结构，该芯片包括由上至下依次叠置的上盖、细胞筛分单元及底片，细胞筛分单元上的单元结构包括液体通道及设置于液体通道中的单细胞筛分结构，上盖上的单元结构包括进液口及出液口，该进液口及出液口分别位于液体通道两端的上方。本发明将分支链DNA信号放大技术与微流控芯片结合，该芯片的特点是将单细胞筛分与核酸提取、检测等功能集成在一个微流控芯片上，单细胞裂解后释放出的核酸可以被芯片上微球进行目标捕获，然后进行分支链DNA信号放大实现核酸检测的目的。

主权项

1.一种利用分支链DNA信号放大技术检测单细胞中核酸的微流控芯片检测单细胞中核酸的方法，其特征在于：微流控芯片，芯片(1)上均布有多个单元结构，该芯片(1)包括由上至下依次叠置的上盖(2)、细胞筛分单元(3)及底片(4)，细胞筛分单元(3)上的单元结构(31)包括液体通道(312)及设置于液体通道(312)中的单细胞筛分结构(311)，上盖(2)上的单元结构(21)包括进液口(211)及出液口(212)，该进液口(211)及出液口(212)分别位于液体通道(312)两端的上方，液体由进液口(211)进入、经过液体通道(312)后再通过出液口(212)流出；单细胞筛分结构(311)包括单细胞筛分捕获结构A和单细胞筛分捕获结构B，该单细胞筛分捕获结构A和单细胞筛分捕获结构B靠近进液口(211)的一端之间为固定单细胞的空间，液体由单细胞筛分捕获结构A和单细胞筛分捕获结构B之间、单细胞筛分捕获结构A和液体通道(312)之间以及单细胞筛分捕获结构B和液体通道(312)之间流过，液体中的任一单细胞被固定于单细胞筛分捕获结构A和单细胞筛分捕获结构B靠近进液口(211)的一端之间；底片(4)上的单元结构(41)为沿液体流动方向均布的多个微孔(411)，所述微孔位于单细胞筛分结构(311)与出液口(212)之间；将待检测细胞溶液注入到所述芯片中，液体由单细胞筛分捕获结构A和单细胞筛分捕获结构B之间、单细胞筛分捕获结构A和液体通道(312)之间以及单细胞筛分捕获结构B和液体通道(312)之间流过，直至单个细胞被固定在单细胞筛分结构(311)处，即单细胞筛分捕获结构A和单细胞筛分捕获结构B靠近进液口(211)的一端之间，更换缓存液将多余细胞冲出芯片；冲洗后注入细胞裂解液将捕获的单细胞裂解，同时使得细胞裂解后释放出的靶标分子与芯片阵列微孔(411)中设置的经修饰的微球表面的捕获探针进行杂交反应，实现对靶标分子的捕获；而后通过信号放大技术进行对捕获的靶标分子进行相应的定性、定量的检测。