[发明专利]一种海带多糖及其提取分离方法

摘要

本发明提供了一种海带多糖及其提取分离方法。先采用高温高压水提法提取海带多糖粗提物，得率为3.6%，优于传统水提法；多糖粗提物经DEAE‑阴离子交换层析和Sephacryl S‑300凝胶层析二步分离后得到海带纯化多糖PS‑3‑1，其分子量为132 KDa。所得海带纯化多糖具有自由基清除活性，其对羟自由基和超氧阴离子清除率均大于70%，可开发为自由基清除剂药物；同时，该纯化多糖对血管平滑肌细胞具有增殖抑制活性，其增殖抑制率达到75%以上，可用于制备血管平滑肌细胞增殖抑制剂药物。

主权项

1.一种可作为自由基清除剂和血管平滑肌增殖抑制剂的海带多糖，其特征在于：其分子量为132 KDa，其制备方法包括如下步骤：/n（1）取海带干粉，用无水乙醇在50 ℃水浴脱色4 h，过滤取滤渣，室温静置风干即得脱色海带干粉；/n（2）取脱色海带干粉，置于高压灭菌锅内，加入超纯水进行提取；过滤，收集滤液并浓缩至原体积的1/3-1/5；海带干粉与超纯水的重量比为1: 55-70，提取条件为：压力0.1-0.14MPa，时间50-60 min；/n（3）在步骤（2）浓缩后的水提液中加入无水乙醇进行分级沉淀，收集乙醇终体积浓度为75-80 %的沉淀物，即为多糖粗提物；/n（4）取多糖粗提物溶于Tris-HCl缓冲溶液中，经DEAE阴离子交换层析法分离，洗脱液为含0-2 mol/L NaCl的Tris-HCl缓冲溶液，洗脱方式为连续洗脱；分别测定各洗脱峰组分对羟自由基清除活性，收集对羟自由基清除活性较高的第三洗脱峰组分，经透析、浓缩、冷冻干燥，得到多糖粗组分PS-3；/n（5）取多糖粗组分PS-3，溶于pH值为7.0-7.5的PBS缓冲液，经Sephacryl S-300凝胶层析分离，洗脱液为含0.1 mol/L NaCl 的pH值为7.0-7.5 PBS缓冲液，测定洗脱峰组分对羟自由基清除活性，收集洗脱峰组分，经透析、浓缩、冷冻干燥，得到多糖纯化组分PS-3-1。/n