[发明专利]一种高效生产茯苓菌丝体和纤维素酶的培养基及培养方法

摘要

本发明公开一种高效生产茯苓菌丝体和纤维素酶的培养基及培养方法。步骤简述如下：向配制的液体无机盐基础培养基中加入经粉碎的富含纤维素物质，培养基经高温灭菌冷却至室温，向培养液中加入少量微量元素和生长因子，将经活化的茯苓菌丝接种到上含有不超过三角瓶体积10%的培养基中，室温下培养至菌丝体长满三角瓶瓶底，按1：50左右比例将菌丝体再转接到基它含有培养液的三角瓶中，室温下培养2周，过滤得茯苓菌丝体和培养液，培养液用3，5‑二硝基水杨酸测定菌液中的纤维酶达120 IU/ml以上。本方法以简单无机盐和纤维类物质为培养基，在室温下无需摇床或就获得了茯苓菌丝体和高活性纤维素酶的培养液，既有利于苓菌丝体的高效生产和富含纤维素废弃物的利用，又可以节约能源和资源。

主权项

一种高效生产茯苓菌丝体和纤维素酶的培养基及培养方法，其特征在于，无需摇床或发酵罐，以无机盐为基础培养基和含纤维素物质为主要原料，在室温下培养，既得到了茯苓菌丝体又获得了富含纤维素酶的培养液，具体来说，本发明主要包括以下步骤：（1）无机盐基础培养基的主要成分为（质量体积比）：磷酸钾(1‑2%)和磷酸(0.5‑1%)；（2）微量元素及生长因子溶液的主要成分为：Fe²+(1‑2 mol/L)Cu²⁺(10‑40 mmol/L)、Zn²⁺(2‑20 mmol/L)、Mo²⁺(50‑200 mmol/L)、Mn²⁺ (20‑50 mmol/L)、Bo₃^‑(2‑40 μmol/L)、 I^‑(1‑10 μmol/L)、生物素（40 mg/L）、复合维素B (10 mg/L)；（3）取50 ml无机盐基础培养基用氨水调节pH5‑6和0.5‑2 g经粉碎的富含纤维素的物质（以纸屑纤维为例进行说明）于500 ml广口三角瓶内封口膜密封，121℃湿热灭菌15分钟后冷却至室温，无菌工作台内添加50 μl微量元素及生长因子溶液，将活化的茯苓菌丝划成小于0.5平方厘米的菌丝块，接种1‑2%，封口膜密封，室温下，无需发酵罐或摇床、无需温控，自然培养培养至菌丝体长满三角瓶瓶底；（4）利用纱布过滤，得到茯苓菌丝体和富含纤维素酶的培养液体。