[发明专利]一种妇科再造丸UPLC指纹图谱的建立方法

摘要

本发明公开了一种妇科再造丸UPLC指纹图谱的建立方法。该方法可快速、准确地鉴别产品的真伪优劣，具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点；用该方法还能较为全面地反映妇科再造丸中所含化学成分的种类与数量，进而对其质量进行整体描述和评价，可将妇科再造丸质量与其药效真正结合起来，有助于阐明其作用机理为本妇科再造丸的技术提升与深度开发提供了依据。且用该方法检测到的妇科再造丸指纹图谱化学成分相对较多、各特征峰高度比例适中，基线较平稳，分离度、峰形和柱效好。

主权项

1.一种妇科再造丸UPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述妇科再造丸由按重量份计算的酒当归60‑70份、醋炙香附60‑70份、白芍40‑50份、熟地黄15‑30份、阿胶5‑20份、茯苓60‑70份、党参15‑30份、黄芪15‑30份、山药25‑40份、白术10‑20份、酒蒸女贞子40‑50份、醋炙龟甲25‑40份、山茱萸15‑30份、续断15‑30份、盐杜仲15‑30份、肉苁蓉5‑20份、覆盆子10‑20份、鹿角霜2‑10份、川芎40‑50份、丹参15‑30份、牛膝10‑20份、益母草15‑30份、延胡索10‑20份、油酥三七2‑10份、醋炙艾叶40‑50份、小茴香15‑30份、藁本15‑30份、海螵蛸25‑40份、醋炙地榆25‑40份、益智5‑20份、泽泻15‑30份、醋炙荷叶10‑20份、秦艽15‑30份、地骨皮15‑30份、白薇40‑50份、椿皮25‑40份、琥珀2‑10份、 酒黄芩25‑40份、酸枣仁5‑20份、制远志10‑20份、陈皮25‑40份和甘草15‑30份按下述方法进行制备而成：以上四十二味，黄芪、盐杜仲、熟地黄、续断、秦艽、肉苁蓉、牛膝、地骨皮加水煎煮2次，每次2h合并煎煮液，滤过，滤液浓缩；取阿胶适量水烊化与上述浓缩液合并，浓缩至80℃时相对密度为1.10的浸膏，其余味粉碎成细粉，过筛，混匀，用上述浸膏泛丸，制成浓缩丸，60‑80℃干燥，包糖衣，打光，即得；所述UPLC指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：（1）对照品溶液的制备：精密称取橙皮苷、黄芩苷适量，放入25mL棕色容量瓶中，加入甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，制成橙皮苷0.30‑0.45mg·mL‑1、黄芩苷0.10‑0.35mg·mL‑1的对照品溶液，即得；（2）供试品溶液的制备：取妇科再造丸，粉碎成粉末后，称取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入55‑65%甲醇40‑60mL，称定质量，超声提取0.5‑1.5h，放冷，再称定质量，用40‑60%甲醇补足减失的质量，摇匀，过虑，即得；（3）色谱条件：色谱柱：ACQUITY UPLC Hss T3 1.8µm 2.1×100mm Column；流动相：A相为0.1%甲酸水溶液；B相为乙腈，梯度洗脱；柱温：50℃；流速：0.2‑0.4mL·min‑1；检测波长：250‑310nm；进样量2μL；所述梯度洗脱条件为：0～22min，2～20%B；22～30min，20～28% B；30～36min，28～50% B；（4）指纹图谱的制作：按上述方法制备供试品溶液，在上述色谱条件下进样，记录谱图得到妇科再造丸的UPLC指纹图谱；（5）指纹谱图的确认：按照上述提供的方法，对多批次妇科再造丸建立了UPLC指纹图谱，通过分析比较确定了15个共有峰，这些共有峰构成了妇科再造丸的指纹特征，作为妇科再造丸的指纹图谱。