[发明专利]一种从禽和猪组织中提取哌嗪残留并衍生化的方法

摘要

本发明涉及兽药残留检测领域，具体涉及一种禽和猪组织中哌嗪残留的提取、净化和衍生化的方法。该方法是以纯乙腈为提取剂，正己烷为去脂剂，使用加速溶剂萃取仪(ASE)处理组织样品，在线去脂与哌嗪提取连续进行，所得提取液经固相萃取法净化、真空离心浓缩仪浓缩以及乙酸酐法柱前衍生。经提取、净化和衍生化的样品通过气相色谱串联质谱(GC‑MS/MS)进行确证分析。本发明哌嗪的提取回收率均达到90％以上。

主权项

一种从禽和猪组织中提取哌嗪残留并衍生化的方法，其特征在于，包括(1)加速溶剂萃取仪提取、(2)固相萃取净化、(3)柱前乙酸酐法衍生化的步骤；其中：步骤(1)加速溶剂萃取仪提取是：使用加速溶剂萃取仪在80℃和1500psi压力条件下分两步操作，第一步正己烷去脂，第二步纯乙腈萃取哌嗪；其中纯乙腈作为提取溶剂，样品依次与无水硫酸钠、硅藻土混匀装填入萃取池，在80℃和1500psi条件下，在线正己烷去脂与哌嗪萃取连续进行，自动化提取；步骤(2)固相萃取净化具体是：经步骤(1)所得的萃取液过Strata‑X‑C固相萃取小柱，先依次用3mL甲醇、3mL 2.0％甲酸水溶液将SPE小柱活化平衡，上样后待提取液匀速流干后，再依次用3mL 0.1mol/L的盐酸水溶液、3mL 0.1mol/L的盐酸甲醇淋洗，最终待小柱干燥后，用2mL 5.0％氨水甲醇分两次进行洗脱；收集洗脱液于具塞离心管中；步骤(3)柱前乙酸酐法衍生化是：将装有净化收集液的具塞离心管，置于离心浓缩仪中，40℃真空负压浓缩至干，后加入1.0mL二氯甲烷溶解残渣，涡旋混匀后，转移至10mL玻璃小瓶，并加入50μL乙酸酐和100μL三乙胺，拧紧瓶盖，于50℃温度下衍生30min后取出，冷却至室温，衍生后液体并洗涤液转移至2mL具塞离心管，涡旋振荡使基质混匀，12000×g，常温离心10min，将上层清液过0.22μm滤膜，滤液供GC‑MS/MS测定分析。