[发明专利]一种葡聚糖和酒石酸钾钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法在审
申请号: | 201610239713.2 | 申请日: | 2016-04-18 |
公开(公告)号: | CN105820237A | 公开(公告)日: | 2016-08-03 |
发明(设计)人: | 高志刚;汪世军;王峰 | 申请(专利权)人: | 东台市赐百年生物工程有限公司 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/14 |
代理公司: | 江苏银创律师事务所 32242 | 代理人: | 王纪营 |
地址: | 224242 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种葡聚糖和酒石酸钾钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法,包括如下步骤:(1)用蒸馏水清洗新鲜的螺旋藻2~4次,洗涤干净的螺旋藻经压力为200~400kg/cm2的高压细胞匀浆机破碎5~6min,超声波处理12‑15min,将破碎的螺旋藻悬浊液于离心机中离心10~18min,离心收集上清液,制得含藻蓝蛋白的粗提液于4~5℃下储存;(2)双水相萃取:向步骤(1)所得含藻蓝蛋白的粗提液中加入葡聚糖和酒石酸钾钠,彻底搅拌1~2h,静置过夜使两相分开,收集上相;(3)采用膜孔径为3~5um的滤膜对藻蓝蛋白粗提液进行粗过滤,制得双水相萃取藻蓝蛋白。本发明分离效果好,过滤分离回收率高,产品质量高,运行成本低。 | ||
搜索关键词: | 一种 聚糖 酒石酸 钾钠双水相 萃取 分离 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
一种葡聚糖和酒石酸钾钠双水相萃取分离藻蓝蛋白的方法,其特征在于包括如下步骤:(1)制备藻蓝蛋白粗提取液:用蒸馏水清洗新鲜的螺旋藻2~4次,洗涤干净的螺旋藻经压力为200~400kg/cm2的高压细胞匀浆机破碎5~6min,超声波处理12‑15min,将破碎的螺旋藻悬浊液于离心机中离心10~18min,离心收集上清液,制得含藻蓝蛋白的粗提液于4~5℃下储存;(2)双水相萃取:向步骤(1)所得含藻蓝蛋白的粗提液中加入葡聚糖和酒石酸钾钠,彻底搅拌1~2h,静置过夜使两相分开,收集上相;(3)采用膜孔径为3~5um的滤膜对藻蓝蛋白粗提液进行粗过滤,处理时间为20~26小时,再于‑13~‑8℃冷冻干燥8~15小时,制得双水相萃取藻蓝蛋白。
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