[发明专利]一种菘蓝-甘蓝远缘杂交四倍体育种方法

摘要

本发明公开了一种菘蓝‑甘蓝远缘杂交四倍体育种方法，包括以下步骤：对种子低温萌芽；将幼芽在微重力条件光照培养，长成幼苗，将两种幼苗移栽到大田，直至开花；以菘蓝为母本，甘蓝为父本，进行远缘杂交，得到菘蓝‑甘蓝杂交体植株，收获种子；将种子萌发生芽，使用秋水仙碱和α射线辐照协同诱导染色体加倍；筛选出四倍体幼芽，继续生长，将得到的四倍体植株移至大田中栽培，自花授粉，得到菘蓝‑甘蓝远缘杂交四倍体种子，连续播种5代～8代，得到性状稳定的菘蓝‑甘蓝远缘杂交四倍体种子，即得。本发明通过以菘蓝为母本甘蓝为父本进行远缘杂交方法育种，形成各种性状优良的后代杂种，使物种性状更加丰富多样。

主权项

一种菘蓝‑甘蓝远缘杂交四倍体育种方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，低温萌芽：选择种粒饱满的菘蓝种子和甘蓝种子，在福尔马林溶液中浸泡30min～50min，揉搓去除种子表皮，然后将处理后的种子用湿布包裹，在3℃～8℃的温度条件下进行催芽处理48h～72h，直至长出3mm～8mm的菘蓝幼芽和甘蓝幼芽；步骤二，光照培养：将菘蓝幼芽和甘蓝幼芽分别移种到液体培养基中，使培养基在微重力条件下匀速旋转，使用氙灯模拟光照培养2天～3天，直至长成株长为10cm～15cm的菘蓝幼苗和甘蓝幼苗，分别将两种幼苗移栽到大田中，给予正常的光照、水分及肥料条件，进行必要的田间作业维护，直至两种植物开花；步骤三，远缘杂交：以步骤二中得到的菘蓝为母本，甘蓝为父本，使用细毛刷小心收集甘蓝雄花花粉，加水制成花粉悬浮液，使用小软毛刷将花粉悬浮液涂抹在菘蓝雌花花柱柱头上，之后再在菘蓝雌花花柱柱头上涂抹丙酮‑乙醇溶液，促进异花授粉过程，授粉完成后进行套袋处理，扎紧袋口，防止外源花粉干扰，然后继续培育，得到菘蓝‑甘蓝杂交体植株，收获种子，备用；步骤四，四倍体育种：将步骤三得到的种子进行萌发培养，生出幼芽，使用浓度为2％～20％的秋水仙碱每4h均匀涂抹在幼芽上，持续100h～160h；之后使用α射线辐照20h～40h，将处理过的幼芽使用流式细胞仪进行倍性分析，筛选出四倍体幼芽，将筛选出的四倍体幼芽移栽至B5培养基中继续生长，直至长成株长为5cm～8cm的四倍体植株；步骤五，制种：将步骤四得到的四倍体植株移至大田中栽培，自花授粉，植株成熟后收集得到菘蓝‑甘蓝远缘杂交四倍体种子，连续播种5代～8代，得到性状稳定的菘蓝‑甘蓝远缘杂交四倍体种子，即得。