[发明专利]一种重组脊髓灰质炎病毒样颗粒及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201610232296.9 | 申请日： | 2016-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN105802923B | 公开（公告）日： | 2019-07-16 |
| 发明（设计）人： | 饶子和;孙瑶;王祥喜;杨盼 | 申请（专利权）人： | 中国科学院生物物理研究所 |
| 主分类号： | C12N7/04 | 分类号： | C12N7/04;C12N15/866;A61K39/13;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人： | 李红团 |
| 地址： | 100101 北京市朝阳*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种重组脊髓灰质炎Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型病毒样颗粒，并进一步公开其制备方法，以及其在制备疫苗药物领域的应用。本发明所述制备重组脊髓灰质炎病毒样颗粒的方法，在昆虫表达系统中成功的制备了脊髓灰质炎Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型病毒样颗粒，且所述脊髓灰质炎Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型病毒样颗粒可有效用于制备基于病毒样颗粒的脊髓灰质炎疫苗。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 脊髓灰质炎病毒 颗粒 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种重组脊髓灰质炎病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取脊髓灰质炎病毒的P1基因和3CD基因分别克隆到共表达载体中，随后通过转化感受态细胞得到能够表达脊髓灰质炎病毒样颗粒的重组病毒载体；(2)用步骤(1)得到的重组病毒载体转染昆虫细胞，培养后获得含有编码病毒样颗粒蛋白基因的重组病毒；(3)将步骤(2)获得的重组病毒感染至宿主细胞进行扩增以提高病毒滴度，随后接种高滴度的重组病毒侵染昆虫细胞，以表达上述P1基因和3CD基因，并按照常规纯化方法获得脊髓灰质炎病毒样颗粒；所述P1基因和所述3CD基因均为根据宿主细胞的偏好性进行密码子优化的基因；其中，所述脊髓灰质炎病毒为Ⅰ型病毒，其优化的P1基因序列如SEQ ID NO:1所示，其优化的3CD基因序列如SEQ ID NO:2所示；或者，所述脊髓灰质炎病毒为Ⅱ型病毒，其优化的P1基因序列如SEQ ID NO:3所示，其优化的3CD基因序列如SEQ ID NO:4所示；或者，所述脊髓灰质炎病毒为Ⅲ型病毒，其优化的P1基因序列如SEQ ID NO:5所示，其优化的3CD基因序列如SEQ ID NO:6所示。
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