[发明专利]一种采用Sema3A基因促进脂肪干细胞成骨分化、抑制成脂分化的方法有效
申请号: | 201610231687.9 | 申请日: | 2016-04-14 |
公开(公告)号: | CN105754949B | 公开(公告)日: | 2020-03-17 |
发明(设计)人: | 宋应亮;朱文忠;刘向伟;周宇超;谭乃文;张思佳;许晓茹;任帅 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第四军医大学 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 王霞 |
地址: | 710032 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种采用Sema3A基因促进脂肪干细胞成骨分化、抑制成脂分化的方法,属于细胞生物学技术领域。本发明构建了含有Sema3A基因序列的重组质粒,通过将Sema3A重组质粒和辅助包装质粒转染进入293T细胞获得Sema3A慢病毒载体,慢病毒载体在polybrene的协助下将Sema3A基因导入脂肪干细胞,显著地促进了脂肪干细胞的成骨分化,同时也抑制了脂肪干细胞向成脂方向的分化,导入Sema3A基因可以更好地将脂肪干细胞应用于促进骨缺损愈合和种植体骨结合,充分发挥脂肪干细胞来源广泛,易于获取的优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 采用 sema3a 基因 促进 脂肪 干细胞 分化 抑制 方法 | ||
【主权项】:
一种采用Sema3A基因促进脂肪干细胞成骨分化、抑制成脂分化的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将Sema3A的基因序列克隆到质粒上,获取Sema3A重组质粒;2)将Sema3A重组质粒转化进入细菌,并对Sema3A重组质粒基因进行测序验证;3)将测序验证过的含有Sema3A重组质粒的细菌进行扩增培养,然后提取扩增培养后细菌内含有的Sema3A重组质粒;4)将Sema3A重组质粒和辅助包装质粒共转入293T细胞,获取Sema3A慢病毒表达载体;5)将获取的Sema3A慢病毒表达载体感染脂肪干细胞,促进脂肪干细胞成骨分化、抑制成脂分化。
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