[发明专利]宠物食品中赭曲霉毒素B的液相色谱‑串联质谱检测方法

摘要

本发明公开了一种宠物食品中赭曲霉毒素B的液相色谱‑串联质谱检测方法，本发明能够准确测定宠物食品中赭曲霉毒素B的含量。在宠物食品样品中加入乙腈水溶液超声萃取得到待检液，待检液经HLB固相萃取柱净化，使用C18反相柱分离；目标分析物在多反应监测(MRM)模式下以保留时间和离子对信息比较进行定性分析，外标法定量，本方法分析速度快、灵敏度高、重现性和准确度好，为检测宠物食品中赭曲霉毒素B提供了检测方法。

主权项

一种宠物食品中赭曲霉毒素B的液相色谱‑串联质谱检测方法，其特征在于包括以下步骤：步骤（一） 待测样品的制备：称取4.9‑5.1 g混合均匀的宠物食品，加入乙腈和水体积比为1∶1的乙腈水溶液提取，经超声萃取后，离心过滤后加纯水定容得到待检液；步骤（二） 待检液的净化：将固定相萃取柱进行预处理，将步骤（一）制备的待检液上固定相萃取柱，固定相萃取柱为Waters Oasis HLB SPE柱，并通过甲醇、水对SPE柱进行活化处理，经水和甲醇和水体积比为1∶2的甲醇水溶液淋洗除去杂质，再用甲醇作为洗脱溶剂洗脱固定相萃取柱上的赭曲霉毒素B得到洗脱液，将洗脱液浓缩富集后，用甲醇溶剂稀释并经0.22μm微孔滤膜过滤后得到待测样品溶液；步骤（三） 待测样品溶液的检测：配制赭曲霉毒素B溶液阶梯浓度的基质校准工作溶液，该校准工作溶液的浓度为0.1 ng/mL、 0.5 ng/mL、1.0 ng/mL 、2.0 ng/mL 和5.0 ng/mL，将基质校准工作溶液和步骤（二）中的待测样品溶液在液相色谱‑串联质谱仪上分别进样，获得以基质校准工作溶液中赭曲霉毒素B的浓度为横坐标，再以基质校准工作溶液中赭曲霉毒素B的峰面积为纵坐标的工作曲线，还有获得可以确定母离子的赭曲霉毒素B的一级质谱图，确定母离子后，采用子离子扫描获得二级质谱图，然后从二级质谱图中选取定量离子和定性离子，然后用基质校准工作溶液曲线对定量离子进行定量计算获得待测样品溶液中赭曲霉毒素B的浓度，所述的液相色谱‑串联质谱仪的检测参数为：色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18反相柱；流速：0.25 mL/min；流动相：A为0.1%甲酸的水溶液；B为纯乙腈；进样量：10 μL；色谱柱温度：30 ºC；电喷雾离子源：正离子扫描，电压为4500V；离子源温度：450 ºC；雾化气压力：50 psi；辅助气流速：40 psi ；气帘气压力：20 psi ；碰撞气压力：20 psi。