[发明专利]一种用于治疗肝癌的基因工程疫苗及其制备方法在审
| 申请号： | 201610087444.2 | 申请日： | 2016-02-16 |
| 公开（公告）号： | CN105535965A | 公开（公告）日： | 2016-05-04 |
| 发明（设计）人： | 崔长友 | 申请（专利权）人： | 崔长友 |
| 主分类号： | A61K39/39 | 分类号： | A61K39/39;A61K38/19;A61K39/00;A61P35/00;C12N5/16 |
| 代理公司： | 长沙星耀专利事务所 43205 | 代理人： | 许伯严 |
| 地址： | 210046 江苏省南京市栖霞区*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于治疗肝癌的基因工程疫苗及其制备方法，该疫苗包括GM-CSF基因修饰的人肝癌细胞和佐剂；所述GM-CSF基因修饰的人肝癌细胞制备步骤包括：用含GM-CSF基因的重组仙台病毒上清液感染人肝癌细胞，得GM-CSF基因修饰的人肝癌细胞；对GM-CSF基因修饰的人肝癌细胞灭活并热休克处理；所述佐剂制备步骤包括：取对数生长期的人肝癌细胞接种于含体积百分比10％FBS的RPMI 1640细胞培养液中，加入15～25μmol/mL的化合物(Ⅰ)培养36～48h得细胞培养液；将细胞培养液离心弃上清液，沉淀悬浮于生理盐水中，再放入液氮中冷冻5～10分钟，再将冷冻物取出，放入37℃温水融化，如此反复冻融3～5次。佐剂可以显著增强GM-CSF基因修饰的人肝癌细胞对肝癌细胞的杀伤力，二者具有显著的协同作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 治疗 肝癌 基因工程 疫苗 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种肝癌基因工程疫苗，其特征在于，包括GM‑CSF基因修饰的人肝癌细胞和佐剂；所述GM‑CSF基因修饰的人肝癌细胞通过如下步骤制备：步骤S1，用含GM‑CSF基因的重组仙台病毒上清液感染人肝癌细胞，得到GM‑CSF基因修饰的人肝癌细胞；步骤S2，对步骤S1得到的GM‑CSF基因修饰的人肝癌细胞灭活并进行热休克处理；所述佐剂通过如下步骤制备：步骤S1，取对数生长期的人肝癌细胞接种于含体积百分比10％FBS的RPMI 1640细胞培养液中，加入15～25μmol/mL的如下结构式的化合物(Ⅰ)培养36～48h得细胞培养液，![]()
步骤S2，将细胞培养液离心弃上清液，沉淀悬浮于生理盐水中，再放入液氮中冷冻5～10分钟，再将冷冻物取出，放入37℃温水融化，如此反复冻融3～5次，即可得所述佐剂。
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