[发明专利]一种古代羊毛织品间接竞争法检测试纸的制备方法在审

专利信息
申请号: 201610078943.5 申请日: 2016-02-04
公开(公告)号: CN105717291A 公开(公告)日: 2016-06-29
发明(设计)人: 游秋实;王秉;刘意;刘杨 申请(专利权)人: 浙江理工大学
主分类号: G01N33/558 分类号: G01N33/558
代理公司: 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 代理人: 尉伟敏
地址: 310018 浙江省杭州市下*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明涉及文物检测技术领域,公开了一种古代羊毛织品间接竞争法检测试纸的制备方法,包括:向PBS缓冲液中加入荧光微球、1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺溶液和兔抗角蛋白抗体溶液,搅拌均匀后用牛血清蛋白溶液封闭后离心处理,将沉淀加入到PBS缓冲液中复溶混匀,制得荧光标记兔抗角蛋白抗体溶液。将羊毛角蛋白稀释液和山羊抗兔抗体稀释液分别喷在硝酸纤维素膜的检测线和质控线上,烘干备用;将荧光标记兔抗角蛋白抗体溶液稀释后包被在荧光结合垫上,烘干备用;将样品垫、荧光结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次组装并切割成条,制得检测试纸。本发明操作简单,检测试纸成本低,反应时间短,灵敏度高,适合考古现场的检测。
搜索关键词: 一种 古代 羊毛 织品 间接 竞争 检测 试纸 制备 方法
【主权项】:
一种古代羊毛织品间接竞争法检测试纸的制备方法,其特征在于步骤如下:A) 荧光标记兔抗角蛋白抗体的制备:向每2.5‑3.5mL的PBS缓冲液中依次加入0.14‑0.16mg的荧光微球、2.6‑2.8μL的现配的浓度为4‑6mg/mL的1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺溶液和8‑12μL的浓度为0.4‑0.6mg/mL的兔抗角蛋白抗体溶液,得到A混合液,将所述A混合液在室温下搅拌1.5‑2.5h,用0.5‑1.5wt%的牛血清蛋白溶液封闭25‑35min后在8000‑10000 r/min、4℃条件下离心处理8‑12min,移除上清液,将沉淀加入到体积为兔抗角蛋白抗体溶液30倍的PBS缓冲液中复溶、混匀,制得荧光标记兔抗角蛋白抗体溶液,将所述荧光标记兔抗角蛋白抗体溶液保存备用;B)试纸条的组装:用喷膜机将5‑20体积份的羊毛角蛋白稀释液和5‑20体积份的山羊抗兔抗体稀释液分别喷在硝酸纤维素膜的检测线和质控线上,在36‑38℃下烘干备用;将5‑20体积份的荧光标记兔抗角蛋白抗体溶液稀释10‑20倍后包被在荧光结合垫上,在36‑38℃下烘干备用;将样品垫、荧光结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次组装在 PVC底板上,并切割成条状,制得检测试纸,将所述检测试纸放入带干燥剂的铝箔袋中密封储存。
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