[发明专利]一种农杆菌介导的高效玉米骨干自交系遗传转化的方法

摘要

本发明公开了一种玉米自交系遗传转化的方法。本发明所提供的玉米自交系遗传转化的方法包括下述步骤：将含有目的基因的重组表达载体导入农杆菌，得到重组农杆菌；重组农杆菌对玉米自交系的幼胚进行侵染；取所述玉米自交系的幼胚，置于共培养培养基，进行共培养；取所述玉米自交系的幼胚，依次置于恢复培养基I、筛选培养基I、筛选培养基II、恢复培养基II和分化培养基进行培养，获得幼苗；取所述幼苗置于生根培养基进行培养，获得玉米自交系转化苗。将本发明提供的玉米自交系遗传转化的方法应用在玉米自交系遗传转化中，可获得较高的转化率，对玉米育种及玉米基因功能研究工作具有重要意义。

主权项

一种玉米自交系遗传转化方法，包括如下步骤：(1)将含有目的基因的重组表达载体导入农杆菌，得到重组农杆菌；(2)取步骤(1)得到的重组农杆菌，对玉米自交系的外植体进行侵染；(3)完成步骤(2)后，取所述外植体，置于共培养培养基，进行共培养；(4)完成步骤(3)后，取所述外植体，置于恢复培养基Ⅰ，进行初次恢复培养；(5)完成步骤(4)后，取所述外植体，依次在筛选培养基Ⅰ和筛选培养基Ⅱ上进行培养，获得抗性愈伤组织；(6)完成步骤(5)后，取所述抗性愈伤组织，置于恢复培养基Ⅱ，进行二次恢复培养；(7)完成步骤(6)后，取所述抗性愈伤组织，置于分化培养基进行培养，获得幼苗；(8)完成步骤(7)后，取所述幼苗置于生根培养基进行培养，获得玉米自交系转化苗。