[发明专利]一种茯苓三萜类化合物的检测方法

摘要

本发明涉及一种茯苓三萜类化合物的检测方法，该方法包括以下步骤(1)超声提取；(2)用有机溶剂对步骤(1)得到的蒸干物质进行萃取数次，合并有机层，蒸干后，再用醇溶解，使用0.22μm有机膜滤过，取续滤液注入高效液相色谱仪进行检测。本发明所述方法具有较高的灵敏度、精密度和准确性。

主权项

一种茯苓三萜类化合物的含量检测方法，所述茯苓三萜类化合物为茯苓酸、去氢茯苓酸、土莫酸、去氢土莫酸、猪苓酸C以及3‑表‑去氢土莫酸，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)超声提取；(2)利用有机溶剂对步骤(1)的产物进行萃取，并用醇溶解；(3)对步骤(2)醇溶液进行高效液相色谱检测；所述方法的步骤(1)包括下述步骤：称取待测样品，粉碎后配制成样品醇溶液，密塞超声提取，过滤，再将滤液蒸干；其中，所述粉碎后过的筛网为60目以上；所述超声提取次数为2～3次，每次20～40min；所述每次使用醇的量为样品质量的25～35倍；所述方法的步骤(2)包括下述步骤：用有机溶剂对步骤(1)得到的蒸干物质进行萃取数次，合并有机层，蒸干后，再使用醇溶解；其中，所述使用有机溶剂萃取次数为3次以上，每次有机溶剂的用量为样品质量的15～25倍；所述蒸干后溶解所需醇的量为4～6mL；所述方法的步骤(3)包括下述步骤：取步骤(2)醇溶液进行高效液相色谱检测；其中，高效液相色谱的检测条件为：采用C18液相色谱柱，流动相由A相和B相组成，进行梯度洗脱，使用PDA二极管阵列检测器进行检测，其中所述A相为色谱乙腈，B相为含有体积分数0.05％～0.5％的磷酸水溶液，检测波长为210nm和243nm，柱温为20～40℃，流速为1.7mL/min，所述梯度洗脱的条件为：0～33min，流动相A相的体积分数保持为51％，B相的体积分数保持为49％；33～45min，流动相A相的体积分数由51％升为54％，流动相B相的体积分数由49％降至46％；45～51min，流动相A相的体积分数由54％继续升为100％，流动相B相的体积分数由46％降至0％；51～55min，流动相A相的体积分数保持100％，流动相B相的体积分数保持0％；55～55.5min，流动相A相的体积分数由100％降至51％，流动相B相的体积分数由0％升至49％；55.5～60min，流动相A相的体积分数保持51％，流动相B相的体积分数保持49％，所述样品是食品、药材、药材提取物或者它们的混合物；所述醇选自甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇中的一种或几种；所述有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸丁酯、氯仿或二氯甲烷中的一种或几种。