[发明专利]双阴性T细胞的转化扩增方法有效

专利信息
申请号: 201610039152.1 申请日: 2016-01-20
公开(公告)号: CN105483083B 公开(公告)日: 2018-10-23
发明(设计)人: 张栋;李新民;赵新颜;孙广永;刘锴;田丹;田月;施文;孙晓静;许虎峰 申请(专利权)人: 北京医明佳和生物科技有限公司
主分类号: C12N5/0783 分类号: C12N5/0783;A61K35/17;A61P37/06;A61P37/02;A61P35/00;A61P31/00;A61P37/08;A61P1/16
代理公司: 北京汲智翼成知识产权代理事务所(普通合伙) 11381 代理人: 陈曦;唐莉
地址: 100176 北京市大兴区经济技术*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种双阴性T细胞的转化扩增方法,包括如下步骤:(1)提取起始样品中的单个核细胞,去除该单个核细胞中的CD8+T细胞和NK细胞;(2)将步骤(1)得到的样品在体外用包含T细胞刺激剂及细胞因子的培养基中培养;在培养过程中同时加入OX40的激活抗体或OX40的配体;(3)培养5~7天后,提纯双阴性T细胞。本发明无需提纯CD4+T细胞或天然DN T细胞即可实施,降低了操作难度,增加了操作效率。培养周期短。本发明可有效降低DN T细胞在扩增中的凋亡率,同时增强其免疫抑制功能。DN T细胞的收获率较之现有技术有极大的提升。本发明获得的DN T细胞具有显著的免疫抑制功能,分裂增殖的CD4T细胞的百分比较之现有技术下降到2.94%,抑制率可达到93%。
搜索关键词: 扩增 阴性 免疫抑制功能 单个核细胞 提纯 操作效率 培养周期 起始样品 细胞因子 培养基 体外用 抑制率 增殖的 凋亡 抗体 配体 去除 转化 激活 分裂 收获
【主权项】:
1.一种双阴性T细胞的转化扩增方法,其特征在于包括如下步骤:(1)提取起始样品中的单个核细胞,去除该单个核细胞中的CD8+T细胞和NK细胞;(2)将步骤(1)得到的去除CD8+T细胞和NK细胞的单个核细胞在体外用包含T细胞刺激剂及细胞因子的培养基中培养;在培养过程中同时加入OX40的激活抗体或OX40的配体;(3)培养5~7天后,提纯双阴性T细胞。
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