[发明专利]使用质子转移反应的蛋白质或多肽的混合物的质谱法的方法有效

专利信息
申请号: 201580039138.5 申请日: 2015-07-17
公开(公告)号: CN106537151B 公开(公告)日: 2018-06-01
发明(设计)人: J·L·小斯蒂芬森;J·E·P·赛卡;A·A·斯佩希特 申请(专利权)人: 萨默费尼根有限公司
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;C12Q1/04;H01J49/00
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司 31100 代理人: 陶家蓉
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 发明公开离子‑离子反应化学方法的应用,其中使用质子转移反应(PTR)以:(1)简化引入到质谱仪中的样本的复杂混合物分析,以及(2)通过移除电荷且减少碰撞横截面而改善超过50kDa的大蛋白质的分析的分辨率和灵敏度。
搜索关键词: 质子转移反应 蛋白质 复杂混合物 离子反应 电荷 混合物 灵敏度 质谱法 质谱仪 分辨率 多肽 移除 离子 样本 分析 引入 应用
【主权项】:
1.一种用于识别液体样本内的第一蛋白质或多肽分析物化合物和第二蛋白质或多肽分析物化合物的存在或不存在的方法,所述液体样本包括化合物的混合物,所述混合物包含多种蛋白质化合物或多种多肽化合物或多种蛋白质和多肽化合物,所述方法包括:(a)将所述液体样本的一部分引入到质谱仪的电喷射电离源中;(b)通过电喷射电离形成所述液体样本的所述部分的所述化合物混合物的带正电离子,所述带正电离子包括多个离子物质;(c)隔离所述离子物质的第一子集和第二子集,所述第一子集包括第一质荷比(m/z)比率范围,所述范围包含所述第一蛋白质或多肽分析物化合物的特定预定多质子化分子物质的m/z比,所述第二子集包括第二质荷比(m/z)比率范围,所述范围包含所述第二蛋白质或多肽分析物化合物的特定预定多质子化分子物质的m/z比;(d)通过致使所述隔离的离子物质的第一子集和第二子集在预定持续时间中与反应剂阴离子反应而从所述隔离的离子物质的第一子集和第二子集产生多个第一代产物离子物质,所述反应剂阴离子在反应后从一或多个离子物质中的包括蛋白质或多肽化合物的质子化分子物质的每一者提取质子;(e)使用质量分析器产生所述第一代产物离子物质的质谱或从所述第一代产物离子物质产生的第二代产物离子物质的质谱;(f)进行对所述第一代或所述第二代产物离子物质的所述质谱的搜索以找到作为所述第一蛋白质或多肽分析物化合物的诊断的一或多个m/z比的第一集合,和进行对所述第一代或所述第二代产物离子物质的所述质谱的搜索以找到作为所述第二蛋白质或多肽分析物化合物的诊断的一或多个m/z比的第二集合;以及(g)如果在所述质谱中识别出一或多个m/z比的所述第一集合,那么识别所述样本内的所述第一蛋白质或多肽分析物化合物的存在,和如果在所述质谱中识别出一或多个m/z比的所述第二集合,那么识别所述样本内的所述第二蛋白质或多肽分析物化合物的存在。
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