[发明专利]混合型己酸菌培养液的生产方法

摘要

本发明公开了混合型己酸菌培养液的生产方法，包括如下步骤，配制培养基，121℃度下，灭菌20分钟；将己酸菌（CK-j1）接种于培养基中，在33～35℃条件下活化培养5～7天，制得一级种子液；按体积5%～8%的比例提取一级种子液，接种于二级己酸菌菌种培养基中，33～35℃的条件下培养10～12天，得到二级种子液；采用1000L酒缸作为培养容器，按体积3%～5%的比例提取二级种子液，接种于生产培养基中，加入二级种子液，温度控制在30～35℃，培养20～30天时，制作成混合型己酸菌培养液。本发明符合科学规律、生产成本低、操作简单，适合己酸菌培养液生产中推广应用。

主权项

一种混合型己酸菌培养液的生产方法，包括如下步骤：（1）培养基配方如下：1000mL水，乙酸钠8～10g,硫酸镁0.3～0.4g，硫酸铵0.8～1g，酵母膏1.5～2.5g，磷酸氢二钾0.6～0.8g，1.5～2.5g碳酸钙（单独灭菌），20～25mL乙醇（不灭菌单独加入）；（2）121℃度下，培养基灭菌20分钟；（3）将己酸菌（CK‑j1）接种于培养基中，接种容器为若干250mL三角瓶，碳酸钙、乙醇加入培养基，每个250mL三角瓶需加入15～20mL的己酸菌菌种，接种后需将没有接种的培养基加入到已经接种的三角瓶中，以液面在三角瓶口颈部离三角瓶顶端瓶口4～5cm为宜，接种后采用液体石蜡液封培养，石蜡的使用量为1～1.5mL，接种三瓶，每瓶300～330mL，在33～35℃条件下活化培养5～7天，制得己酸菌种子液，己酸菌浓度为1.5～5.0×10⁸CFU/mL，可以作为一级种子液使用；（4）按体积5%～8%的比例提取一级种子液，接种于二级己酸菌菌种培养基中，接种容器为若干5L三角瓶，二级己酸菌菌种培养基配方同上述培养基的配方,碳酸钙、乙醇加入培养基，每个5L三角瓶需加入300～400mL的一级种子液，接种后需将没有接种的培养基加入到已经接种的三角瓶中，以液面在三角瓶口颈部离三角瓶顶端瓶口4～7cm为宜，接种后采用液体石蜡液封培养，石蜡的使用量为2～3mL，将接种后的二级己酸菌菌种培养基在33～35℃的条件下培养10～12天，己酸菌浓度为1.5～2.5×10⁸CFU/mL，可以作为二级种子液使用，可进行大规模生产接种；（5）采用1000L酒缸作为培养容器，酒缸消毒采用酒精消毒方法，使用75%酒精2L,清洗缸体内面反复2次，生产培养基配方如下：40～50斤大曲粉，2～2.5Kg碳酸钙，4～5Kg乙酸钠，350～450Kg酒尾，300～400Kg黄水，80～150Kg三级酒；按体积3%～5%的比例提取二级种子液，接种于生产培养基中；添加顺序为：先加入酒尾和黄水，测定酒度，根据酒度情况添加三级酒，最终保证生产培养基酒度控制在23～28度，然后添加大曲粉，再添加碳酸钙和乙酸钠，随后使用乙醇灭菌的木棒搅拌，使添加的大曲粉分散，添加的盐类物质溶解，最后加入二级种子液；温度控制在30～35度，培养20～30天时，己酸菌浓度达到5.0～9.0×10⁷CFU/mL时，制作成混合型己酸菌培养液。