[发明专利]一种番茄苗期根结线虫病抗性鉴定方法

摘要

本发明提供一种番茄苗期根结线虫病抗性鉴定方法，包括以下几个步骤：步骤A：材料准备：步骤B:抗性鉴定:将番茄苗移至玻璃瓶中，向玻璃瓶内注入营养液，接种根结线虫二龄幼虫,将玻璃瓶放置人工气候箱进行培养，记录根结及卵囊产生的时间。步骤C:抗性评价:接种根结线虫二龄幼虫后，观察根结线虫发育进程，当侵染已知感病番茄品种的根结线虫完成一个世代时将待抗性评价的番茄品种取出调查根结病级，按根结病级计算根结指数，根据根结指数进行品种的抗感特性评价。本方法可以对整个抗性鉴定过程进行可视观察，一旦侵染已知感病材料的根结线虫完成一个世代立刻进行抗性评价。

主权项

1.一种番茄苗期根结线虫病抗性鉴定方法，其特征在于，包括以下几个步骤：步骤A：材料准备：步骤1.制备霍格兰营养液；步骤2.番茄材料：将待抗性评价的番茄品种播种在无病的育苗盆中，待苗长到4-5片真叶时将番茄苗拔出用清水将根部冲洗干净后用于抗性鉴定实验；步骤3.根结线虫二龄幼虫：取形成大量根结及卵囊的植物根部在清水中冲洗，洗去表面的杂质；然后将洗干净的植物根放于烧杯中，加次氯酸钠并用玻璃棒迅速搅拌，使其混合均匀；之后过筛，反复多次冲洗后取过目筛，即获得有大量卵粒的悬浮液；再将该悬浮液缓缓倒入孵化筛中孵化获取根结线虫二龄幼虫；步骤B:抗性鉴定:分别将待抗性鉴定番茄品种即红吉星、Bss368、FLA653-3-1-0、感性对照大明星和抗病对照仙客1号，即携带Mi抗病基因苗移至玻璃瓶中，向玻璃瓶内注入营养液，接种根结线虫二龄幼虫,将玻璃瓶放置人工气候箱进行培养，记录根结及卵囊产生的时间；步骤C:抗性评价:接种根结线虫二龄幼虫后，观察根结线虫发育进程，当侵染已知感病番茄品种的根结线虫完成一个世代时将待抗性评价的番茄品种取出调查根结病级，按根结病级计算根结指数，根据根结指数进行品种的抗感特性评价；番茄品种根结线虫病抗性水平按照以下标准进行确定：根结分级标准：0级：无根结；1级：有根结根数占整个根系的5％以下；2级：有根结根数占整个根系的5％～25％；3级：有根结根数占整个根系的26％～50％；4级：有根结根数占整个根系的51％～75％；5级：有根结根数占整个根系的76％以上；公式为：抗性分级标准，以根结指数为依据，分为5个等级：免疫：根结指数为0；高抗：根结指数为1.0～10.0；抗病：根结指数为10.1～25.0；感病：根结指数为25.1～40.0；高感：根结指数为40.0以上；所述步骤1中，营养液配方由A液、B液、C铁盐溶液和D微量无素液组成，A液为：四水硝酸钙900-1000mg/L、硝酸钾450-550mg/L、硝酸铵70-90mg/L；B液为：磷酸二氢钾120-150mg/L、七水硫酸镁450-550mg/L；C铁盐溶液为：七水硫酸亚铁5-6mg/L、乙二胺四乙酸二钠6-8mg/L；D微量元素液为：碘化钾0.002-0.005mg/L、硼酸0.02-0.04mg/L、硫酸锰0.1-0.2mg/L、硫酸锌0.03-0.05mg/L、钼酸钠0.0005-0.001mg/L、硫酸铜0.005-0.03mg/L；所述步骤3中，次氯酸钠的质量浓度为5-10％。