[发明专利]一种利用响应曲面法优化白刺多糖的复合酶微波提取方法

摘要

本发明涉及一种利用响应曲面法优化白刺多糖的复合酶微波提取方法，该方法包括以下步骤⑴样品制备将新鲜白刺果实制成白刺果粉；然后按不同的料液比、不同浸泡时间、不同微波功率、不同提取时间进行反应提取，得到对应于不同微波功率的白刺多糖提取物干燥粉末；⑵用苯酚‑硫酸法测定每个提取液中多糖含量；⑶实验设计与统计分析①单因素试验；②响应面法优化设计根据单因素试验结果，选取多糖提取效果影响较显著的微波功率、提取时间、浸泡时间、料液比这4个因素建立多元二次回归方程；⑷实验结果分析与优化利用Design Expert 8.0软件根据多元二次回归方程进行绘图分析，得到回归方程的响应面及其等高线图。本发明操作简单、提取率高。

主权项

一种白刺多糖的复合酶微波提取方法，包括以下步骤：将新鲜白刺果实洗净，在30~35℃温度下烘干48~72h后粉碎至40~80目，按10~30mL/g料液比加入体积浓度为80%的乙醇溶液，在18℃~25℃浸泡2~4h后过滤，得到滤渣，该滤渣于40~60℃下干燥12~24h，即得脱除脂类、色素和小分子糖的白刺果粉；然后在微波反应器中，按15mL/g的料液比加入复合酶溶液，40~50℃静置浸泡2h，在350W的微波功率下按30min的时间进行反应提取，提取后的溶液以4000~5000转/min进行离心，15~20min后收集上清液A，该上清液A经50~60℃真空旋转蒸发浓缩至原体积的1/6~1/8后，得到浓缩产物；所述浓缩产物中加入其体积3~4倍的无水乙醇溶液混匀，当其溶液中乙醇浓度为80%时，于2~6℃下静置12~24h，再以4000~5000转/min进行离心，15~20min后收集沉淀；沉淀加水复溶后，以4000~5000转/min进行离心，15~20min后收集上清液B，该上清液B于‑70℃~‑85℃预冻4~6h，最后在大气压力为10~100Pa、温度为‑55℃~‑70℃的条件下冷冻干燥24~72h，得到白刺多糖提取物干燥粉末；所述复合酶溶液是指蛋白酶、纤维素酶和果胶酶等质量混合后加去离子水配制而成的pH为4~5的溶液。