[发明专利]微生物絮凝剂协同活性炭固定絮凝沉降油脂酵母的方法

摘要

一种微生物絮凝剂协同活性炭固定絮凝沉降油脂酵母的方法，属于微生物技术领域。本发明的目的是利用活性炭特性结合微生物絮凝技术，对油脂酵母进行絮凝沉降的微生物絮凝剂协同硅藻土固定絮凝沉降油脂酵母的方法。本发明的步骤是活性炭的处理、酱油曲霉制备微生物絮凝剂、斯达氏油脂酵母培养液的制备、活性炭对斯达氏油脂酵母的固定化、微生物絮凝剂絮凝沉降活性炭固定化的斯达氏油脂酵母。本发明固定化的斯达氏油脂酵母菌，操作简单，斯达氏油脂酵母菌的絮凝沉降率高；斯达氏油脂酵母菌的絮凝沉降率保持在93.90%～99.62%。

主权项

一种微生物絮凝剂协同活性炭固定絮凝沉降油脂酵母的方法，其特征在于：其步骤是：(1)活性炭的处理取活性炭，在200℃下干燥2 h；冷却至室温后，按活性炭和水的体积比为1:3称取活性炭和水；将活性炭和水搅拌均匀后，加入浓度为38%硫酸；水浴温度80℃条件下充分搅拌2 h；之后抽滤，用除盐水对活性炭进行多次洗涤，至滤液pH值呈中性；将过滤后的活性炭在200℃下烘干；取出活性炭置于300℃马弗炉中烘烤2.5 h后置于干燥器中备用；(2) 酱油曲霉制备微生物絮凝剂将保存在斜面上的菌株编号为CGMCC NO：3.5231的酱油曲霉接入到无菌的发酵培养基中，所述的酱油曲霉发酵培养基中各组分用量分别为：葡萄糖；NaNO3；MgSO4·7H2O；KCl；FeSO4；KH2PO4；pH=6.0；在30℃摇床上以180 rpm培养3天，得到高絮凝活性的微生物絮凝剂；冷却至室温后，将微生物絮凝剂存放在4℃冰箱中保存备用；(3) 斯达氏油脂酵母培养液的制备将保存在斜面上的菌株编号为CGMCC NO：2.1560的斯达氏油脂酵母接入到无菌的种子培养基中，所述的斯达氏油脂酵母种子培养基中各组分用量分别为：葡萄糖；（NH4）2SO4；酵母粉；KH2PO4；MgSO4·7H2O；pH=6.0；在22℃摇床上以150 rpm培养1天，得到培养好的斯达氏油脂酵母菌悬液，将得到的菌悬液存放在4℃冰箱中保存备用；(4) 活性炭对菌株编号为CGMCC NO：2.1560的斯达氏油脂酵母的固定化取步骤（3）得到的斯达氏油脂酵母菌悬液，投入到无菌的限氮培养基中，所述的限氮培养基中各组分用量分别为：葡萄糖；（NH4）2SO4；酵母粉；KH2PO4；MgSO4·7H2O；pH=6.5；取步骤（1）得到的活性炭，加入到上述已经接入斯达氏油脂酵母的限氮培养基中，在22℃摇床上以150 rpm培养3天，得到活性炭固定化的斯达氏油脂酵母菌悬液；(5) 微生物絮凝剂絮凝沉降活性炭固定化的菌株编号为CGMCC NO：2.1560的斯达氏油脂酵母，取步骤（2）得到的微生物絮凝剂，投入到步骤（4）得到的活性炭固定化的斯达氏油脂酵母菌悬液中，用混凝搅拌器以300 rpm快速搅拌1 min，然后以30 rpm慢速搅拌3 min，然后静置5 min，静置时每隔1 min取上清液，用分光光度计在 600 nm 处测定其吸光度，计算絮凝沉降率，实现微生物絮凝剂絮凝沉降活性炭固定化的斯达氏油脂酵母。