[发明专利]一种冠心宁片的指纹图谱的建立方法及其应用

摘要

本发明公开了一种冠心宁片的指纹图谱的建立方法，取10个批次以上的冠心宁片研细后混匀，加入蒸馏水或体积浓度0～100％的甲醇水溶液，超声处理，放冷，过滤，取滤液，得供试品溶液，然后进行高效液相色谱分析，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积浓度0.1％磷酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B进行梯度洗脱，得到不同批次冠心宁片的液相色谱图，导入国家药典委员会提供的中药色谱指纹图谱相似度评价系统，设置多点校正，自动匹配，软件自动生成冠心宁片的标准指纹图谱。本发明获得的冠心宁片的标准指纹图谱可用于冠心宁片生产工艺监控、质量评价或者真伪鉴别中的检测。

主权项

一种冠心宁片的标准指纹图谱在冠心宁片生产工艺监控、质量评价或者真伪鉴别中的应用；所述的标准指纹图谱的建立方法包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：将冠心宁片研细后混匀，精密称取0.05～0.50g，加入25～100mL的蒸馏水或体积浓度0～100％的甲醇水溶液，其中的0代表无限接近于0但不为0，超声处理10～30分钟，放冷，过滤，取滤液，即得供试品溶液；(2)色谱分析：取10个以上批次的冠心宁片按照步骤(1)方法制备供试品溶液，然后按照以下条件进行高效液相色谱分析，得到不同批次冠心宁片的液相色谱图；色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积浓度0.1％磷酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B进行梯度洗脱，梯度洗脱程序为：0～10min时流动相A的体积分数为97％，10～30min时流动相A的体积分数为97～87％，30～35min时流动相A的体积分数为87～86％，35～60min时流动相A的体积分数为86～80％，60～90min时流动相A的体积分数为80～77％，90～100min时流动相A的体积分数为77～75％，检测波长为250～330nm，柱温为20～30℃；(3)步骤(2)获得的不同批次冠心宁片的液相色谱图导入国家药典委员会提供的中药色谱指纹图谱相似度评价系统，设置多点校正，自动匹配，软件自动生成冠心宁片的标准指纹图谱;所述标准指纹图谱，有6个已定性的色谱特征峰，分别为：丹参素对应的4号色谱峰，原儿茶醛对应的6号色谱峰，咖啡酸对应的10号色谱峰，阿魏酸对应的11号色谱峰，迷迭香酸对应的15号色 谱峰，丹酚酸B对应的17号色谱峰；以丹酚酸B对应的17号峰为参照峰，标准指纹图谱中各共有峰的相对保留时间和相对峰面积如下表：共有峰编号 相对保留时间 相对峰面积 1 0.08～0.09 0.02～0.03 2 0.10～0.11 0.02～0.03 3 0.16～0.17 0.03～0.04 4 0.22～0.23 0.12～0.13 5 0.29～0.30 0.01～0.02 6 0.31～0.32 0.09～0.10 8 0.37～0.38 0.02～0.03 10 0.40～0.41 0.03～0.04 11 0.57～0.58 0.07～0.08 12 0.73～0.74 0.04～0.05 13 0.74～0.75 0.38～0.39 14 0.80～0.81 0.07～0.08 15 0.82～0.83 0.06～0.07 16 0.88～0.89 0.07～0.08 17 1.00 1.00 18 1.10～1.11 0.19～0.21                                                                       。