[发明专利]产生物乳化剂的嗜热地芽孢杆菌及其在高凝油开采中的应用

摘要

产生物乳化剂的嗜热地芽孢杆菌及其在高凝油开采中的应用。本发明涉及一株嗜热地芽孢杆菌基因工程菌A‑2，保藏号CGMCC No.10151。该菌株是由嗜热地芽孢杆菌DM‑2通过表达载体pUCG18导入自身的糖基转移酶基因构建而成的基因工程菌。菌株A‑2在45‑70℃条件下以葡萄糖、乙酸钠、乙醇、十六烷、橄榄油为碳源条件下乳化剂产量可达3‑4g/L，较初始菌株DM‑2提高了6倍左右。产生的乳化剂能够耐高温、耐盐、耐酸碱，对正己烷、柴油、二甲苯，十六烷，橄榄油和原油石油烃有显著的乳化作用，对高凝油有显著的乳化、降粘和降凝作用，现场试验亦证实菌株A‑2及其产生的生物乳化剂可用于高凝油油藏的开采。

主权项

一种生物乳化剂，其特征在于：将保藏号为CGMCC No.10151的基因工程菌A‑2在45‑70℃条件下利用葡萄糖、乙酸钠、乙醇、十六烷或橄榄油这5种不同类型的碳源中的一种发酵产生，产量可达3‑4g/L；具体发酵条件如下：将保藏于甘油管中的菌株A‑2活化，涂布LB平板，60℃培养过夜；挑取单菌落，接种到5mL的LB试管，60℃，200rpm，培养12h；再以1%的接种量接种到LB三角瓶中作为种子液，培养至OD600为0.5‑0.8，即处于对数期内，5%接种到产乳化剂的发酵培养基中，60℃，200rpm，培养48h；所述产乳化剂的发酵培养基配方以g/L计为：K2HPO4·3H2O 4.8，KH2PO4 1.5，（NH4）2SO4 1，柠檬酸三钠 0.5，MgSO4·7H2O 0.2，酵母提取物 0.1，CaCl2·2H2O 0.002，MnCl2·4H2O 0.0004，NiCl2·6H2O 0.0004，ZnSO4·7H2O 0.0004，FeCl3·6H2O 0.0002，NaMoO4·2H2O 0.0002，蒸馏水1000ml；其中碳源分别为葡萄糖、乙酸钠、乙醇、十六烷或橄榄油5类中的一种，各碳源的添加量分别为5g/L。