[发明专利]观察动物DRG、脊髓结构及记录脊髓电活动的方法

摘要

本发明涉及一种观察动物DRG、脊髓结构及记录脊髓电活动的方法，其包括以下步骤：(1)DRG手术；(2)DRG病毒注射；(3)同时观察脊髓侧面轴突和DRG手术；(4)背侧轴突观察手术；(5)背侧插电势差监测电极手术；(6)成像。本发明观察动物背腹侧轴突对比和脊髓电活动的方法可避免成像时反复手术，降低了试验动物的疼痛和压力，能对动物脊髓侧面观察及运动和感觉神经元轴突对照研究，能对动物脊髓背侧在清醒状态下观察；有助于实现整个神经系统的全方位贯通，对整个神经系统自身的结构及功能运行机制的研究起到极大的推动作用，对学习睡眠等动物行为学的整体化研究分析提供了切实可行的方法。

主权项

一种观察动物DRG、脊髓结构及记录脊髓电活动的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)选择成年转基因荧光小鼠，将其麻醉后进行剃毛处理，接着分离小鼠剃毛区的皮肤和肌肉组织之间的筋膜，找到一节段脊椎并暴露其横突下的DRG，接着封闭DRG暴露区以形成封闭观察室，最后等待小鼠恢复；(2)选择一个成年转基因荧光小鼠，将其麻醉后进行剃毛处理，接着分离小鼠剃毛区的皮肤和肌肉组织之间的筋膜，找到不同于上述步骤(1)的一节段脊椎并暴露其横突下的DRG，向DRG内注射病毒后，缝合剃毛区皮肤，等待小鼠恢复后饲养；(3)选择一个成年转基因荧光小鼠并对其进行剃毛处理，然后分离剃毛区的皮肤和肌肉组织之间的筋膜，选择不同于上述步骤(1)、(2)的一节段脊椎并暴露其横突，接着封闭DRG暴露区，以形成封闭观察室，最后等待小鼠恢复；(4)选择一个成年转基因荧光小鼠，将其麻醉后进行剃毛处理，接着分离小鼠剃毛区的皮肤和肌肉组织之间的筋膜；再牵开剃毛区皮肤，将椎板从脊髓上切除分离；最后覆盖封闭椎板切除部位，以形成封闭观察槽，等待小鼠恢复；(5)选择一个成年转基因荧光小鼠，将其麻醉后进行剃毛处理，接着分离小鼠剃毛区的皮肤和肌肉组织之间的筋膜；再牵开剃毛区皮肤，去除覆盖在与上述步骤(4)相同的一节段脊椎上的肌肉组织，将两根电极插入脊椎背侧后突旁和头尾端；再将所述两根电极插入到脊柱一侧肌肉组织中，最后粘合牵开的皮肤，等待小鼠恢复；(6)将上述步骤(1)至(5)所选择的小鼠均调整到自然状态，进行观察成像，最后放回鼠笼饲养。