[发明专利]一种金纳米棒生物复合物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种金纳米棒生物复合物及其制备方法和应用，属于电化学分析技术领域。采用二氧化硅修饰的金纳米棒（AuNRs@SiO₂）作为载体结合检测抗体（_dAb）和二茂铁甲酸（Fc）制备_dAb-AuNR-Fc，并将其用于放大电化学免疫分析乳制品中大肠杆菌。基于大肠杆菌与其抗体之间的特异性相互作用构建“三明治”免疫分析模式，采用示差脉冲伏安法测定结合在电极表面的Fc获得电流信号。本发明基于_dAb-AuNR-Fc生物复合物的电化学免疫分析方法用于大肠杆菌的检测灵敏度高、特异性强、准确度高，为乳制品中大肠杆菌的分析研究提供了新方法。

主权项

一种_dAb‑AuNR‑Fc的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：（1）AuNRs@SiO₂的制备：首先，根据经典的种子法制备十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）包被的金纳米棒（AuNR‑CTAB）；其次，制备AuNRs@SiO₂：将10 mL AuNR‑CTAB于9000转/分钟离心10分钟，加入10 mL超纯水重悬，反复2次；在搅拌条件下，向10 mL AuNR‑CTAB水溶液中加入100 µL氢氧化钠（0.10 mol/L），然后加入60 µL正硅酸乙酯/3‑氨基丙基三乙氧基硅烷的乙醇溶液，继续搅拌24小时后收集，即得到AuNRs@SiO₂，然后将其用超纯水洗涤并分散于5.0 mL磷酸缓冲溶液（PBS）中，待用；（2）_dAb‑AuNR‑Fc的建立：取1.0 mL AuNRs@SiO₂溶液，在搅拌条件下，加入1.0 mL 1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐/N‑羟基琥珀酰亚胺混合溶液反应10分钟，然后依次加入10 µL检测抗体（_dAb）（4.0 mg/mL）、1.0 mL二茂铁甲酸（Fc）饱和水溶液，继续搅拌2小时即制得_dAb‑AuNR‑Fc；将其用超纯水洗涤并分散于1.0 mL PBS中保存于4 °C冰箱。